Волчий клык растение: лекарственное растение, ядовитое растение, применение, отзывы, полезные свойства, противопоказания

лекарственное растение, ядовитое растение, применение, отзывы, полезные свойства, противопоказания

Купена, или соломонова печать – род многолетних трав, для которых характерны симподиальные узловатые корневища с похожими на печать круглыми, вдавленными рубцами на местах отмерших годичных побегов, отсюда и второе название – «соломонова печать». Стебель очень разной высоты (от 2,5 см до 2 м и более), прямостоячий, вверху несколько дуговидный. Листья очередные, супротивные или мутовчатые, цельнокрайние, линейные, овальные, продолговатые или широкоэллиптические (4-10 см длины и 2-5 см ширины), острые, сидячие, с дуговидным жилкованием, иногда с усиками. Цветки обоеполые, 3-членные, большей частью зеленовато-белые, иногда желтые, розовые или фиолетовые, в пазушных малоцветковых кистях. Околоцветник простой, трубчатый или колокольчатый. Тычиночные нити приросшие к листочкам околоцветника. Пыльники стреловидные, качающиеся, интрорзные. Плод – шаровидная ягода, с 1-2 семенами. Опыляется главным образом шмелями, возможно самоопыление. Размножается семенами. Время цветения май-июнь.

Среди купен наиболее известны и широко распространены евроазиатские виды: купена душистая (лекарственная) и купена многоцветковая.

Купена душистая, или лекарственная (лат. Poligonatum odoratum Mill.) – многолетник 30-120 см высоты с резко угловатым стеблем, горизонтальным, относительно тонким корневищем, шероховатыми снизу по жилками листьями и пазушными одиночными (реже по 2) белыми цветками (2-2,5 см длины). Листья обычно очередные, направлены вверх. Околоцветник длинно-трубчатый, без перетяжки под завязью, с короткими зеленоватыми зубцами. Цветки обладают запахом горького миндаля, богаты нектаром. Опыляются только длинно-хоботковыми шмелями. Плод – темно-синяя, почти черная ягода. Цветет в мае-июле.

Купена многоцветковая (лат. Poligonatum multiflorum L.) – многолетник 15-50 см высоты с гладким цилиндрическим стеблем. Листья слегка сизые, почти горизонтально распростертые. Цветки белые (2-2,5 см длины), по 3-5 в пазухах листьев. Околоцветник трубчатый, с перетяжкой под завязью и короткими зеленоватыми зубцами. Цветки гомогамные (одновременно созревают пыльники и рыльце). Нити тычинок опушены узловатыми волосками. Рыльце расположено немного ниже пыльников, а цветки на поникающих цветоножках направлены вниз. Шмели (иногда пчелы, маленькие бабочки), которые их опыляют, просовывая голову в расширенную часть трубки, касаются рыльца и пыльников (вскрывающихся интрорзно), собирают нектар на дне трубки венчика. Перелетая затем на другой цветок, производят перекрестное опыление. Плод – зеленовато-черная ягода. Цветет в мае-июне.

выращивание, размножение, виды и мистика

 

Купена чем-то похожа на ландыш. Как только не называют её в народе: глухим ландышем, кокорником, печаткой, соломоновой печатью, волчьей травой, волчьим клыком, сердечником, вороньими ягодами. Этот неприхотливый многолетник не только декоративен, но и входит в число лекарственных растений.

Купена неприхотлива и быстро разрастается

Описание растения

Купена (Polygonatum) — многолетнее корневищное травянистое растение, которое в природе чаще растёт на лугах и склонах. Одревесневающее многоколенчатое (суставчатое) корневище располагается горизонтально у поверхности почвы. Весной из почки на конце корня отрастает новый стебель. Осенью он отмирает, оставив след, похожий на печать. По количеству небольших круглых рубцов с вдавленной серединой от прошлогодних стеблей («печать Соломона») определяют возраст растения.

Ребристые стебли покрыты тонкой гладкой кожицей зеленого цвета, у некоторых видов с красноватым оттенком. Побеги согнуты в полудугу, на них поочередно расположены крупные сидячие листья овальной формы с гладкими краями, заостренной верхушкой и рельефными прожилками.

В мае — июне купена цветёт. Сначала из пазух листьев по нижней грани стебля свисают белоснежные бутоны колокольчатой формы, потом распускаются цветки. Они пахнут приятно. После опыления появляются плоды. Это красноватые ягоды, которые при созревании становятся сине-черными. Плоды купены с семенами ядовитые.

Цветки купены

Виды купены

Описано около 50 видов купены, многие из которых декоративны.

Купена аптечная (лекарственная), или душистая (P. odoratum). Высота многолетника с ребристыми стеблями, на которых сидят листья овальной формы, 30 — 65 см. Цветение начинается со второй половины мая и длится почти 5 недель. Цветки белоснежные, колокольчатой формы.

Купена мутовчатая (P. verticillatum). Этот вид растения высотой 30 — 60 см цветёт в июне-июле. Его нижние сидячие удлинённые узкие листья прикреплены поочередно, верхние собраны в мутовки по 4 — 8 шт. Популярен сорт «Rubrum».

Купена многоцветковая (P. multiflоrum). Высота многолетника около 1 м. Листья расположены в два ряда. Белоснежные мелкие цветы собраны пучками до четырёх штук в пазухах листьев. Это влаголюбивый вид, который прекрасно растёт в тени. Купена многоцветковая вариегатум (P. odoratum) имеет листья с продольными белыми полосами. Она хороша и после цветения.

Купена широколистная (P. hirtum). Высота этого вида около 50 см. Овальные листья имеют заостренные верхушки. Цветки белые, с зеленоватым оттенком. Они распускаются в конце мая.

Купена приземистая, или низкая (P. humile). Низкорослое растение высотой 15 — 35 см имеет сидячие листья светло-зеленой окраски. Цветки белые с заметным розоватым оттенком.

Купена Хукера (P. hookeri). Это уникальный карликовый вид купены высотой меньше 10 см. Продолговатые листья узкие. Цветки имеют явный фиолетовый оттенок.

Купена пратти (P. prattii). Это очень декоративный вид с лиловыми колокольчиками, собранными в метельчатые кисти. Стебли темно-пурпурные, удлиненные листья зеленовато-серебристые.

Размножение купены

Купена размножается семенами и вегетативно. Рассмотрим сначала семенной способ размножения этого растения, при котором есть возможность вырастить большое количество рассады.

Но он достаточно хлопотный. Можно использовать собственноручно собранные семена. Сначала нужно собрать созревшие плоды, извлечь из них семена и промыть их от мякоти. После этого семена стратифицируют (в холодильнике) в течение месяца. Потом приступают к посеву, заполняя емкость песчано-торфяной смесью. Её оставляют на три месяца в прохладном месте (+ 5°C).

Через три месяца ёмкость с посевами на короткое время переставляют в теплое место (+20 — 23°C). Но для того, чтобы семена дружно проросли, им снова нужна прохлада в течение одного — двух месяцев. После этого ёмкость с посевами держат в тёплом помещении (+20 — 23°C) при рассеянном освещении и регулярно увлажняют почву. Первое время сеянцы растут медленно.

Посадку на постоянное место в цветнике проводят поздней весной. Цветение ожидается только на третий — четвёртый год.

Деление куста — самый простой способ размножения купены. Его обычно проводят в конце лета или ранней осенью. Я делю свои разросшиеся купены весной, когда начинается рост побегов.

Учитываю, что при выкопке и посадке легко обломить молодые ростки.

Кусты желательно делить каждые четыре — пять лет, т.к. разросшаяся купена залезает на территорию соседних растений. Выкопанный куст аккуратно разрезают на части. В каждой делёнке должен быть отрезок корневища с почкой роста, осенью обязательно с частью стебля.

При посадке нужно аккуратно расправить корневище, заглубив его на 5 — 8 см. Делёнки высаживают на расстоянии друг от друга минимум в 20 см. Только после этого проводят полив и подсыпают немного сухой почвы. Осенью нужно дополнительно замульчировать место посадки.

Первые два года купена осваивается на новом месте, после чего зацветает и начинает активно расти.

Капли дождя на листьях купены

Уход за купеной

Место. Купена лучше растет в полутенистом месте.

Полив. Это неприхотливое многолетнее растение на удивление нетребовательно к поливу. В засушливое лето почву приходится увлажнять чаще. Мульчирование прекрасно сохраняет влажность и освобождает от необходимости проводить рыхление, которое может повредить корневище.

Подкормки. В плодородную почву ранней весной вносят комплексное минеральное удобрение. Бедную обязательно сдабривают органикой. Вторую подкормку проводят в период цветения.

Болезни и вредители. Купену относят к растениям с хорошим здоровьем. Но её листья портят слизни и некоторые сосущие вредители.

Сочными листьями купены лакомятся не только слизни, улитки, но и другие вредители, которые появляются во второй половине лета

Зимовка. В средней полосе купена хорошо зимует без сложных укрытий. Достаточно осенью замульчировать землю компостом, смесью торфа и песка или опилками. На продуваемых местах стоит накрыть лапником для снегозадержания. Весной его убирают до того, как появятся молодые побеги.

Купена при оформлении участка

Купена хороша и после цветения. Она имеет изогнутые побеги, которые отмирают только осенью. Этот многолетник часто используют при озеленении тенистых мест, но украшает он и хорошо освещенные территории.

Купена отлично смотрится рядом с камнями и корягами. Особенно, если они покрыты густым мхом. Её можно смело сажать у края декоративных бассейнов и в рокариях, если там есть место с плодородной почвой.

В цветниках изумительно смотрится рядом с почвопокровными растениями, например, с живучкой (аюгой), вербейником монетчатым, барвинком, вероникой нитевидной и др. Прекрасное соседство — с манжеткой садовой, которая подчёркивает красоту других растений (статья «Манжетка: садовое растение или полезный сорняк?»). У меня вокруг этого многолетника поселилось много луковичных первоцветов (крокусов, сциллы и др.). Они на нашем участке давно живут своей жизнью и появляются весной даже в самых неподходящих местах. Купена восхитительно смотрится рядом с белой сиренью.

Цветущая купена и белая сирень

Купена как лекарственное растение

Купену издавна относят к лекарственным растениям, помогающим при многих заболеваниях. Народные целители используют её, но не забывают о противопоказаниях:

Купена — растение ядовитое. Корни, трава, цветки и ягоды обладают рвотным действием. Передозировка может привести к более неприятным, даже опасным явлениям. Купена противопоказана при беременности (Р.Б. Ахмедов «Растения — твои друзья и недруги»).

Это растение снимает боль, воспаления, останавливает кровотечения и помогает при сильном кашле. Но часто самолечение приводит к плохим последствиям. Поэтому без консультации специалиста не стоит употреблять отвары и настои купены внутрь. Лучше использовать свежий сок, нанесённый наружно. Он хорошо заживляет раны и лечит гнойники.

Купена способна быстро заживлять раны, кровоточащие ссадины, ушибы, а также избавлять от синяков и кровоподтёков.
Проще всего воспользоваться отваром: 2 — 3 столовые ложки измельчённых корней отварить на слабом огне в 0,5 л воды 20 минут. Использовать для компрессов и примочек. Внутрь не принимать, так как эта дозировка сильная, незамедлительно вызовет рвоту. Для приёма внутрь пропорции другие. Растение ядовитое, требует внимательного к себе отношения (Р.Б. Ахмедов «Одолень-трава»).

Купена и мистика

Купену часто называют «печатью Соломона», или «Соломоновой печатью». Есть две легенды, связанные с этим растением и библейским царём Соломоном. В одной из них, царь, живший очень долго, отметил своей печатью купену, чтобы было проще находить целебное растение, продлевающее людям жизнь. Во второй легенде царь приказал нанести такой же рисунок на свою печать, какой увидел на круглых рубцах на корневищах купены.

Из засушенного кусочка корневища «с печатью» изготавливают амулет, укрепляющий семейные узы.

Крестьяне отсекали от корня те кусочки, которые были похожи на крест, и носили их в качестве оберега от сглаза, порчи и гнева небесных сил (молний, града и т.п.).

До сих пор на «печати Соломона» знахари заговаривают грыжу.

Побег купены с чётным количеством листьев назывался «лупеной». В прежние времена его настаивали на родниковой воде, а потом умывали ею лицо, чтобы сошла повреждённая кожа. Отыскивали и побег с нечётным количеством листьев, или «

пену». Таким настоем умывались, чтобы свести веснушки и другие пигментные пятна.

Неопалимая купина. Наша красавица купена не имеет ничего общего (кроме схожего произношения) с диктамнусом, или ясенцем (Dictamnus). Это южное многолетнее растение семейства Рутовые хорошо знают в Крыму и на Кавказе. Во время цветения появляется характерный аптечный запах. Плоды пахнут свежесмолотой корицей. Коварство этого красивоцветущего растения заключается в том, что ожог на коже ощущается только через несколько часов, когда появляются водянистые волдыри. После них остаётся ранка. Заживает она долго. Ясенец окутан эфирными парами, поэтому пламя сжигает их, не повреждая само растение. Создаётся впечатление, что огонь его опаляет, но не может поджечь.

Статьи по теме:

© Сайт «Подмосковье», 2012-2021. Копирование текстов и фотографий с сайта pоdmoskоvje.cоm запрещено. Все права защищены.

 

Волчье лыко ядовитое растение. После цветения появляются плоды. Вредные свойства и противопоказания

«Волк в овечьей шкуре» – так можно охарактеризовать это невероятно красивое во время цветения, но коварное растение. Оно легко может убить человека, но от него ждут помощи в лечении рака. Предлагаемая статья рассказывает, как распознать волчье лыко среди других кустарников, почему оно так называется, как и где его можно применять и что делать при отравлении его алыми ягодками.

Волчье лыко — внешний вид ягод

Если встретить волчник обыкновенный в конце апреля, то может показаться, что каким-то чудом в европейском лесу зацвела сакура. Листьев еще нет, а душистые розовые цветочки уже облепили ветви в ожидании пчел. Но, в отличие от пятилепестковой японской вишни, цветки волчеягодника имеют только четыре расположенных крестиком лепестка.

Волчье лыко – это невысокий, до 1,5 м, кустарник с разветвленной корневой системой и серой морщинистой корой. Его узкие листья располагаются по большей части на вершинах побегов и напоминают листья лавра. Сверху они окрашены в насыщенно-зеленый цвет, а снизу принимают сизоватый оттенок. Красные ягоды в форме бочонков ботанически верно именуются костянками, поскольку содержат всего одно семя.

Волчья ягода первой зацветает в средней полосе России и выглядит весьма изысканно, но пусть это никого не обманывает: растение смертельно ядовито.

Все народные названия кустарника: «волчий клык», «волчий перец», «волчий плющ», «волчажник» указывают вовсе не на то, что серый хищник лечится его корой или плодами. Без вреда для себя ягоды волчьего лыка могут употреблять только некоторые виды лесных птиц. Просто народный фольклор связывает с волком все злое, опасное, смертельное.

Если все волчьи эпитеты, которыми награждено растение, указывают на присутствие ядов, то слово «лыко» связано с тем, что крепкий луб кустарника использовали для плетения мелких изделий. Кроме того, и народные лекари применяли внутренний пласт коры – луб, то есть именно то, что в народе называют «лыко».

Великий шведский систематик Карл Линней дал волчнику имя Daphne mezereum в честь прекрасной нимфы Дафны. Страдающая от преследований влюбленного Аполлона, Дафна упросила отца превратить ее в деревце, которого нельзя даже коснуться. И действительно, любые части растения, но особенно плоды, накапливают жгучий ядовитый сок.

Химический состав

Ядовитые свойства волчьего лыка объясняются присутствием в соке дитерпеноидов мезереина и дафнетоксина. Эти соединения способствуют ломкости сосудов и замедлению остановки кровотечений. Из других веществ в составе волчеягодника выявлены:

• кумарины дафнин и дафнетин;
• воски и камеди;
• эфирные масла;
• жирные масла;
• пигменты;
• сахара.

Распространение и места обитания

Волчеягодник смертельный распространен по всей Европе, но отчетливо тяготеет к северным регионам. Кольский полуостров, Таймыр, Ямал – везде отлично зимует. На востоке доходит до Иркутской области, далее – как заносное растение в единичных экземплярах. На юге встречается вплоть до предгорий Кавказа, но уже в Молдове или Казахстане числится в Красной книге.

Экологические предпочтения волчеягодника – подлесок смешанных и лиственничных лесов. Он хорошо растет при затенении в окружении лесных травянистых растений.

Применение

Согласно «Ботанико-фармакогностическому справочнику», употребление волчьего лыка в официальной медицине запрещено. Однако в список лекарственных растений оно входит и в народной медицине используется. Главным образом его применяют наружно для:

• раздражения кожи и притока к ней крови при простудных заболеваниях;
• ускорения созревания нарывов и фурункулов;
• согревания суставов при артритах.

На Руси молодые девушки натирали соком волчьих ягод щеки, поскольку свекольные «румяна» откровенно выдают свое происхождение.

Волчеягодник используется в гомеопатии с 1805 года, когда врач-гомеопат Самуэль Ганеман ввел в рецептуру препараты коры волчника под названием «Мезереум» (также можно встретить под названием «растительная ртуть»). Ганеман прекрасно осознавал опасность волчника и рекомендовал довольно высокие разведения при:

• весьма болезненных невралгиях зубного и тройничного нервов;
• послеоперационных невралгиях;
• трофических язвах, связанных с варикозной болезнью;
• хронических отитах и стоматитах;
• опоясывающем лишае;
• конъюнктивите;
• кариесе.

В гомеопатической практике действие препарата объясняется тем, что волчья ягода гонит «черную желчь и слизь».

Лечебные свойства и вред

Действующие вещества волчьего лыка сильно раздражают слизистые оболочки пищеварительного тракта. Есть сведения, что народные лекари использовали отвары и настои волчника как рвотное и слабительное средство.

Мезереин и дафнетоксин проявляют такие полезные свойства, как:

• антикоагулянтные;
• антибактериальные;
• противоопухолевые.

Исследования последних лет допускают вероятность получения из волчника препаратов для лечения тромбофлебита. В перспективе возможно применение антилейкемических свойств растения.

Однако лечение волчьим лыком сопряжено с высоким риском отравления, которое протекает по типу геморрагического гастроэнтерита.

Посадка волчьего лыка в саду и уход за ним

Посвященный нимфе Дафне кустарник удивительно красив и поэтому изредка встречается на приусадебных участках. Его ценят за раннее цветение и нарядность во время плодоношения. Выведены две садовые формы: одна с пестрыми листьями, другая с лиловыми цветками, распускающимися осенью.

При выращивании волчника следует учитывать несколько его особенностей:

• любит легкое затенение, в густой тени не зацветет;
• морозы переносит хорошо, а засуху – плохо;
• категорически не приемлет пересадок.

Волчья ягода хорошо черенкуется. Побеги прошлого года срезают весной и укореняют в торфо-перегнойном контейнере, который полностью помещают в посадочную яму. Лучшее место для растения – под мелколиственным деревом или с северной стороны от беседки, перголы, теплицы.

Чтобы и в дальнейшем не тревожить поверхностные корни, почву под волчником регулярно мульчируют торфом или листовым опадом – не надо будет ее рыхлить. Раз в год можно подкормить кустарник комплексным удобрением. Во время засух желателен полив дождеванием.

Волчеягодник изредка встречается на приусадебных участках

Сбор, заготовка и хранение

В качестве лекарственного средства у волчеягодника используют свежую кору. Ее заготавливают до цветения – в начале и середине апреля. Кору сдирают с молодых побегов, отделяют внутренний слой, режут на полосы и сушат, разложив в один слой. При работе со свежим сырьем обязательно надевают перчатки и защищают глаза.

Плоды собирают при их полном созревании – в конце лета. Их сушат при комнатной температуре в очень сухом помещении. Хранят заготовленное волчье лыко в закрытых пакетах или стеклянных банках в недоступном для детей месте и с обязательной маркировкой: «Ядовито!».

Рецепты

В связи с ядовитостью растения самолечение препаратами волчника, употребляемыми внутрь, категорически запрещено. Применять его можно исключительно наружно при простудных заболеваниях и сильных болях.

Используя раздражающее действие веществ волчеягодника, вызывают прогрев грудной клетки при трахеитах, бронхитах, ангинах, воспалении легких. Для этого высушенную кору размачивают в воде или уксусе и прикладывают вместо горчичников. Противопоказано подобное лечение детям, беременным женщинам, аллергикам и лицам с сердечной недостаточностью.

Для снятия невралгических болей из волчьего лыка готовят мазь:

1. Сначала по 1 г коры и плодов смешивают, заливают 100 мл 70 %-ного спирта.
2. Периодически взбалтывая, настаивают в течение недели.
3. Затем берут 20 мл этой настойки и смешивают с ланолином и вазелином (по 50 г).
4. Больное место перед сном смазывают полученной мазью и оборачивают теплой тканью.
5. Внимательно следят за самочувствием. При малейшем ухудшении здоровья применение волчеягодника прекращают.

Порошок из высушенной и растолченной коры иногда применяют для изгнания из дома муравьев и тараканов при условии, что в доме нет маленьких детей и домашних животных.

Что будет, если съесть волчью ягоду

При отравлении плодами кустарника возникает жжение во рту, обильное слюнотечение, рвота и понос. Развивается слабость, вероятны судороги и головокружение. Попадая в желудок и кишечник, мезереин вызывает множественные кровотечения. Попутно вещество ослабляет способность крови к свертыванию, отчего в тяжелых случаях может наступить смерть от потери крови.

Волчье лыко — ядовитое растение

Какую помощь оказать при отравлении волчьим лыком

Помощь при отравлении волчником начинают до приезда врача, которого вызывают сразу же. Для выведения яда из организма съевшему волчьи ягоды необходимо немедленно промыть желудок. Пострадавшему дают около литра теплой воды, в которой растворяют либо столовую ложку поваренной соли, либо несколько кристаллов марганцовки. Когда человек выпьет всю воду, надавливают на корень языка, вызывая тем самым рвоту.

При необходимости процедуру повторяют. Когда рвота будет состоять из чистой воды, пострадавшему дают сорбент «Энтеросгель», который выведет вещества, успевшие проникнуть дальше желудка. Человека укрывают одеялом, успокаивают, восполняют потерю жидкости теплым чаем.

Нежная красота розовых соцветий и нарядность алых плодов волчьего лыка обманчивы. За привлекательностью внешнего вида таится опасный яд. Ареал волчеягодника медленно, но верно сокращается, но можно надеяться, что медицина найдет способ применить его недюжинные свойства в лечении тяжелых заболеваний.

Лыко – это кустарниковое растение, в диких условиях не превышающее высоты 1 м, но при благоприятных условиях куст может достигнуть 2,5 м. Весной на голых ветвях образуются розовые цветы, которые находятся в пазухах листьев. Чаще всего, данное растение можно встретит в затененных местах на опушке леса.

Как выглядит волчье лыко

Кустарник волчьего лыка представляет собой невысокое растение высотой около 1 м, в осенний и весенний период побеги кустарника, окрашены в серо-коричневый цвет, в некоторых случаях цвет коры может быть желтовато-серой. Как правило, весной у растения образуются молодые побеги, которые имеют более сероватый цвет коры и, к тому же, многие молодые побеги могут быть покрыты коричневатыми пятнами. Но, при этом данное растение маловетвисто и занимает достаточно компактную площадь. Листья, крепятся к побегам с помощью коротких черешков, вытянутые яйцевидной формы, иногда могут быть более узкие, напоминающие чем-то ланцет. Когда образуются цветы в пазухах листьев (обычно цветение в средней полосе России начинается в апреле мае) в южных регионах России, цветение может начаться и раньше. Цветы собраны в пучки и чаще всего имеют розоватый оттенок, реже белый.

После цветения появляются плоды:

• Овальной формы;
• Красноватого цвета;
• Внешне выглядящие аппетитными и сочными.

Данное растение можно встретить в пойменных лесах около берегов водоемов, а также на опушках леса. Предпочитает почвы богатые питательными веществами, данное растение распространено практически по всей Европе и в малой Азии.

Ягоды обычно плотно прилегают друг к другу и плотно обхватывают ветку. Но есть их ни в коем случае нельзя, так как они ядовиты, хватит всего 10–12 ягод, чтобы получить смертельное отравление.

Данного вида растений насчитывается более 50 видов есть растения вечно зеленые, есть полу- листопадные, которые произрастают в основном в теплых районах не только России, но и в теплых районах других стран. Есть виды, которые хорошо переносят суровый климат, такие растения могут произрастать в более северных районах, и в горах.

Какого цвета ягоды волчьего лыка и что представляет собой растение

Волчье лыко – это ядовитое растение, но, тем не менее, очень красивое, особенно по весне, когда начинается цветение. Особенность волчьего лыка в том, что сначала на нем появляются красивые цветы (напоминающие чем-то расцветки сирени), побеги этого растения в период цветения покрываются розовато белыми цветами.

При достаточно длительном нахождении около растения, запах от цветов может спровоцировать головную боль.

Цветы этого растения собраны в пучки, которые чем-то напоминают гнезда (чтобы в этом убедиться, лучше всего посмотреть картинки). При этом, цветы некоторых видов этого растения источают нежнейший аромат. Но при этом стоит подойти поближе, чтобы насладится его запахом, как приятный запах резко сменятся на менее приятный.

Само растение:

1. Представляет собой куст.
2. В диких условиях произрастания редко превышает высоту в 1-1,5 м.
3. Если растение выращивать ради декоративных целей, то высота кустов при соответствующем уходе может достигать высоты до 2 м.

Растение лучше всего растет на более кислых и сыроватых почвах, богатых питательными веществами. В принципе, их выращивают практически на любых грунтах, но важно при этом достаточное увлажнение и подкормка, и тогда растения долгие годы будет радовать человека своими красивыми цветами. Чтобы убедиться в этом, можно посмотреть данные цветущего растения, как оно выглядит, какого цвета, и стоит ли его выращивать у себя на участке.

Что такое лыко

После периода цветения, у волчеягодника появляются узкие листья, которые коротким черенком крепятся к основным побегам. Ближе к осени появляются ягоды, которые внешне выглядят очень красиво, яркие, блестящие красного цвета, но, несмотря на свою красоту, смертельно ядовитые.

Важно при ухаживании за волчатником использовать средства защиты, чтобы не получить ожогов от данного растения, в первую очередь, кожных покровов.

Такие растения, из-за красоты цветов, некоторые люди выращивают у себя в саду и на дачных участках, но стоит быть острожным при этом, так как оно ядовитое. Например, стоит приложиться кожей к коре куста, как можно получить раздражение, а в некоторых случаях и ожог. У данного растения есть множество других названий, например, волчеягодник, дафна и прочие.

Считается полностью ядовитыми все части растения:

• Ягоды;
• А также листья;
• Кора;
• Цветок;
• И даже корень.

Но, несмотря на свою ядовитость, компоненты данного растения широко используются, в первую очередь, в народной медицине. Целебные свойства данного растения известных с давних времен. Чтобы части этого растения принесли пользу при лечении каких-либо недугов, необходим прием микродоз препаратов, изготовленных на его основе, под контролем специалиста. Правильно приготовленные части растений применяются в качестве болеутоляющего, используется при лечении ревматизма, неврологических болей. В некоторых случаях, части этого растения используется при лечении эпилепсии и даже онкологии.

Ядовитое ли растение волчье лыко

Использование части растений в качестве лекарственного средства допускается только лишь после согласования с врачом, так как даже небольшое отклонение или превышение рекомендованной дозы, может вместо улучшения здоровья привести к отрицательному результату. Использование лекарств, для лечения детей допускается, как внутрь, так и снаружи, но только после необходимых анализов и разрешения врача и под его контролем.

При употреблении более мощной дозы, чем рекомендовано, могут возникнуть:

• Боли в животе;
• Судороги;
• Жжение во рту;
• Кожные проблемы и т.д.

Само растение полностью ядовито, несмотря на внешне приятный и красивый вид, каждая часть может вызвать проблемы с кожей, ЖКТ, могут наблюдаться головные боли, сонливое состояние или же наоборот, короткое возбуждение, жар и т.д.

Помимо лечебных свойств данного растения, оно приносит и другую пользу, так как зацветает достаточно рано, то самые первые пчелы начинают сбор будущего меда именно с этих цветков. При настойке из коры и ягод, в некоторых случаях вещества, содержащиеся в них, позволят использовать состав в качестве наружного средства, например, при ревматизме.

Ядовитое растение волчье лыко: описание (видео)

Такое описание данного вида растений позволит человеку предохранить себя от негативного воздействия на свой организм. Но, в то же время, при грамотном использовании, наоборот, сможет принести пользу. Что касается позитивных эмоций, то данное растение позволяет насладиться ранней весной красивыми цветами, причем, даже еще, когда толком не выросла трава, и нет других цветов.

Волчье лыко, дафна, волчец, волчеягодник, волчья ягода — такие названия носит этот небольшой до 1,5 метров в высоту кустарник. Не зря этот кустарник носит такие грозные названия — коварно растение, как и волк — волк нападает тихо, бесшумно, когда не ждёшь, когда и опасности-то вроде нет…- так и это растение — опасен даже запах, а уж какой вид-то привлекательный — так и хочется ягодку в рот положить… У меня воспоминания детства связаны с волчьими ягодами — около дома по краю газонов были высажены волчьи ягоды — и до чего хотелось их попробовать! Спасибо родителям — уберегли. А вот из соседнего подъезда мальчишку, на спор наевшегося ягод, уже и на лицо не помню, и как звали — но похороны оставили страх в моей маленькой душе (лет 4-6, ещё дошколёнок, в 60-х годах) перед этим растением, и непреодолимый внутренний запрет на эту волчеягодную красоту. Но о грустном достаточно. О растении.

Растение ядовито полностью — кора (дафин), корни и плоды (мезерин), ягоды (коккогнинин) — всё это яды, вызывающие тяжёлые отравления. Достаточно попробовать одну — две ягодки, и вас начнёт бить судорога, будут одолевать колики и упадок сил, зрачки глаз расширятся. А 10 — 15 ягод уже смертельны для человека…

Внешний же вид ягод, как и цветки, очень привлекательны. Веточки густо усыпаны ярко-красными шариками на манер облепихи. Веточки очень трудно отломать, и если кто-то попробует это сделать зубами — у того во рту, на языке, на губах появятся долго незаживающие язвочки.

Особое внимание нужно уделить объяснению коварности растения детям — ибо соблазн съесть такие ягоды неимоверно велик! Дети, видевшие красную смородину, часто не обращают внимания на различия и принимают за неё ядовитые ягоды волчеягодника.

Яды из растения используются в медицине, также кора используется в крашении шерсти. Цветы этого кустарника любят пчёлы, птицы вовсю лакомятся плодами.

Волчье лыко цветёт до появления листьев, цветки белые или розовые. Околоцветник простой, опадающий, розовый, трубчато-ворончатый, четырехлопастный.

Листья у него очередные, цельнокрайние, обратнопродолговатые-яйцевидные, с короткими черешками, снизу серо-зеленые.

Волчье лыко, применение. В народной медицине кору растения, размоченную в воде или уксусе, используют вместо горчичника при ревматизме и невралгии; применяют ее в виде мази (наружно).

При параличе мышц языка надо некоторое время держать во рту настойку коры волчьего лыка.

Внутрь препараты из волчеягодника обыкновенного (вытяжку коры) принимают осторожно при золотухе и водянке.

Способы применения.

Вытяжка из волчьего лыка: отвар 20 г сырья в 200 мл воды выпаривают до половины; принимают по 1-2 капли 3 раза в день.

Настойка лыка волчьего: 1 г коры на 65 г спирта; по 1-2 капли 3 раза в день.

Мазь из волчьего лыка: 5 частей настойки на 10 частей вазелина или сливочного масла.

Внимание! Любое применение любых препаратов из волчьего лыка очень опасно и самолечение недопустимо!!!

Высота этого кустарника достигает до одного метра. В среднем размер колеблется от 50 см до 1 м. Если кустарник выращен в благоприятных условиях, то он может достичь в высоте до 2,5 метров. Такие высокие кустарники можно встретить в парковых насаждениях или в садах. Весной, когда на кустарнике еще нет листьев, на его ветвях распускаются сидячие цветки розового цвета. Они имеют очень приятный аромат. Их расположение в основном сосредоточено в пазухах опавших прошлогодних листьев. В каждой такой пазухе растет три цветка. Ствол и ветви этого растения имеют серо-коричневый цвет. Форма листьев ланцетная. Плоды волчьего лыка имеют яйцевидную форму и светло-красный цвет. Цветет этот кустарник в период от начала февраля до конца марта, а в России – с апреля по май. Он произрастает в местах, где мало освещения, а почва богата питательными элементами. Растет волчье лыко на лесных опушках и в пойменных лесах. Его также можно встретить на берегах ручьев и в местах живых изгородей. В северной части Европы это растения встречается реже, нежели на юге континента. Этот кустарник, как и все остальные волчеягодниковые, охраняется.

Волчье лыко, как лечебное средство

В давние времена плоды этого растения использовали в качестве сильного слабительного. Но на сегодняшний день специалисты предостерегают людей употреблять волчье лыко внутрь, так как в нем содержится очень опасное токсичное вещество. Применение в наружных целях тоже не желательно, так как это растение может вызвать нарывы на кожных покровах. Волчье лыко можно использовать только лишь в гомеопатических дозировках под строгим наблюдением специалиста или лечащего врача. В нем содержатся гликозид дафнин, дифнетоксин, флавоноиды, си-тостер-ин, различные смолы и множество других действующих веществ.

Это растение часто используется при лечении онкологических заболеваний. Лекарственные препараты из плодов волчьего лыка применяются в борьбе с лейкемией. Вместе с плодами в лечебных целях применяют и кору. Она очень эффективна при лечении рака гортани, полости рта, пищевода, а так же при раке матки. Спелые ягоды этого кустарника обладают целебным свойством при лечении саркомы. Из таких высушенных плодов и коры делают настой, который употребляют по несколько капель в день. Кора волчьего лыка в измельченном виде используется для лечения опухолей молочных желез. Ее выпускают в виде пилюль или отвара. Это растение используют так же для лечения лихорадки, болезненных ощущений в области груди, кашля , туберкулеза легких и обычного кашля. Волчье лыко излечивает организм от желтухи, желудочно-кишечных заболеваний, дизентерии , атеросклероза , золотухи и тромбофлебита, а так же используется для улучшения аппетита и избавления от хронической усталости.

Побочное действие и противопоказания

Это растения содержит ядовитые вещества. Его плоды могут стать опасными для детей, если они захотят ими полакомиться, будучи в лесу. Десяток таких съеденных ягод может стать причиной смертельного исхода. Если дотронуться до такого кустарника, то он может вызвать раздражение на коже, которое может перейти в некроз. Если употребить внутрь плоды волчеягодника смертельного, то в желудке, кишечнике и почках произойдет сильное раздражение. Основными признаками отравления является диарея, рвота, жар и кожные высыпания. Следует в кротчайшие сроки сделать промывание желудка и немедленно обратиться к врачу. В больнице вам в обязательном порядке будут лечить полость рта и горла.

Для приготовления настойки возьмите 10 грамм порошка из коры этого растения и залейте 0,1 л 70%-го спирта и дайте настояться в течение двух недель в темном помещении. Настойка принимается по капле перед каждым приемом пищи. Со временем нужно выпивать по 30 капель в день. В обязательном порядке настойка разбавляется водой перед применением.

Для приготовления отвара вам понадобится 2 грамма сырья, которые необходимо залить одним стаканом кипятка и прокипятить в эмалированное емкости в течении 20 минут на маленьком огне. После этого отвар процеживается, а сырье отжимается. Его принимают в количестве пяти капель после каждого приема пищи. Курс лечения составляет 5 дней.

Волчье лыко — растение, относящееся к семейству Thymelaeáceae. Название это народное, а по официальной классификации оно именуется как волчеягодник, или волчник обыкновенный. На территории России встречаются 14 его видов.

Описание

Это кустарник, едва достигающий в высоту 1 м, с гибкими тонкими ветвями. Кора его имеет серовато-коричневый оттенок и усеяна бурыми пятнами. Листья округло-продолговатые на укороченных черешках. Цветки трубчатые четырехлепестные с восемью тычинками, напоминающие сирень. Они без цветоножек, располагаются непосредственно на стебле растения волчье лыко. Фото отлично демонстрирует это.

Отличительная особенность

Во время цветения (апрель — начало мая) перепутать это растение с каким-либо другим невозможно. Его безлистные ветки буквально усыпаны сиренево-розовыми цветками, собранными в кучки. Если принюхаться, то можно почувствовать исходящий от них аромат ванили. Только увлекаться этим запахом не стоит, иначе не избежать головной боли и недомогания.

Плоды

Плодами этого растения являются ягоды, созревающие в августе. Они небольшие по размеру, ярко-алого цвета, овальные, сочные. Так же как и цветки, они располагаются на ветках немногочисленными кучками. В это время ветви уже с листьями, правда, только на верхушках.

Почему прижилось такое необычное название

Названия кустарников, как впрочем и других растений, рождаются не на пустом месте. Волчеягодник имеет очень прочную кору. Даже не кору, а лубяной слой, расположенный под ней, именно лыко. Благодаря ему сломать ветку этого кустарника просто, а оторвать — сложно, понадобится немалая сила. Прилагательное в названии прижилось оттого, что волк всегда ассоциировался со злом, коварством. А это растение именно такое.

Ядовитость

Волчье лыко ядовито, причем все его части. Аромат цветков дурманящий, отравляющий. Небольшая капля сока, попавшая на кожу, вызовет жжение, а на слизистой — раздражение. Если по незнанию пожевать веточку, то губы распухнут, в горле будет сильно першить, глаза станут слезиться, заболит голова, повысится температура и могут начаться рвота и судороги.

Распространение

Ученые не пришли к единому мнению том, как распространяется волчье лыко. Одна из версий: птицы склевывают ягоды, без проблем переваривают их и с экскрементами разносят семена.

Почему не встречаются заросли

Волчье лыко на территории России растет на Кавказе, в Сибири и лесостепной зоне европейской части страны. Однако встречается это растение довольно редко. Ботаники считают, что заросли не образуются потому, что растения способны отравлять друг друга, так как содержат ядовитые вещества.

Применение

Волчье лыко содержит гликозиды и флавоноиды, которые при попадании в организм человека способствуют несвертываемости крови, расстраивают пищеварительную систему, а на коже образуют волдыри и ожоги. Однако в народной медицине эти качества используются для лечения невралгий, параличей, подагры, ревматизма, т. е. только как наружное средство. Настойки готовят из свежей коры, собранной в период цветения.

В заключение

Если вам встретится волчье лыко, то гораздо безопаснее полюбоваться им издали. Оно является источником питания для птиц осенью и украшением весеннего леса. Кроме того, растение взято под охрану как редко встречающееся.

описание и характеристики, особенности посадки и выращивания, болезни и вредители, достоинства и недостатки

Основные характеристики сорта:

• Авторы: Россия, сибирская селекция
• Категория: сорт
• Тип роста: детерминантные
• Назначение: употребление в свежем виде, для консервирования , для сока, для кетчупа и томатной пасты
• Срок созревания: ранний
• Сроки созревания, дней: 100-105
• Условия выращивания: для открытого грунта, для закрытого грунта
• Товарность: высокая
• Размер куста: низкорослый
• Высота куста, см: до 60

Посмотреть все характеристики

Томат Волчий клык имеет целый ряд важных преимуществ. Его можно смело выращивать даже в довольно суровых местах. Но все достоинства растения раскрываются только при условии грамотного подхода.

История выведения

Волчий клык вывели в России. Это одна из культур сибирской селекции. Сорт не внесен в государственный реестр. Конкретные разработчики неизвестны. Основной продавец посадочного материала — компания «Сибирский сад».

Описание сорта

Волчий клык относится к числу детерминантных сортов. Его рекомендуют как для открытой, так и для закрытой земли. Высота кустов будет не более 0,6 м. Интенсивность ветвления и количество листьев умеренно велики. Штамб отсутствует.

Основные качества плодов

Этот томат в спелом состоянии имеет красный цвет. Масса ягод колеблется от 120 до 170 г. Они имеют переходную от сердца к перцу форму. Кожура отличается высокой плотностью. Для нее типичен глянцевый отлив.

Вкусовые характеристики

Мякоть Волчьего клыка сочна и плотна. Для нее типична отменная мясистость. Концентрация сахара достаточно велика.

Созревание и плодоношение

Волчий клык — сорт раннего срока созревания. Плоды будут поспевать за 100-105 дней после появления первых всходов. Сбор урожая производится в июле и августе. Лишь изредка погодные условия вносят коррективы в этот график.

Урожайность

Растение имеет достаточно высокую плодовитость. Она может достигать 12 кг на 1 м2. Потому сорт не менее эффективен, чем подавляющее большинство других томатных культур.

Сроки посадки на рассаду и высадки в грунт

Семена можно сеять в контейнеры в марте либо в апреле. Соответственно, высадка готовых сеянцев в свободный грунт или теплицу производится в мае либо в апреле. Конкретные сроки определяются климатическим режимом местности и погодой в конкретный год.

Схема посадки

На 1 м2 необходимо сажать 3 куста томатов. Более плотная высадка грозит серьезными проблемами. Культура начинает болеть и деградировать, помидоры иногда мешают друг другу.

Выращивание и уход

Растение обязательно надо формировать. Допускается формирование кустов как в 2, так и в 3 стебля. Формировка производится максимально просто. Полив очень важен для Волчьего клыка. Очень важна подкормка комплексными минеральными смесями.

Прочие меры выращивания не отличаются от забот о других помидорах детерминантного типа. Важную роль играет своевременность формировки. Обязательным условием успеха является пасынкование. Высадка на постоянное место при температуре воздуха менее +15 градусов нежелательна. Сорняки придется убирать, землю — рыхлить, а поливают куст строго под корень.

Мульчирование после поливов также имеет важное значение. Оно позволяет сохранять больше влаги и меньше использовать воды. Как только появляются соцветия, следует незамедлительно подкармливать культуру минеральными составами с калием и фосфором. Повторное внесение таких удобрений должно произойти еще через 14-20 дней.

Азотные смеси во время цветения вносить нельзя. В период плодоношения ими также пользоваться недопустимо. По возможности надо выбирать участок, где нет опасности от сильного ветра. Влага при поливе не должна попадать на листовые пластины, в противном случае возможны солнечные ожоги. Соблюсти эти рекомендации вполне по силам любому дачнику.

Устойчивость к заболеваниям и вредителям

Для защиты от фитофтороза и альтернариоза необходимы профильные защитные обработки. Специфические вредители для этого растения не описаны. Меры защиты будут те же самые, что и в других случаях.

Устойчивость к неблагоприятным погодным условиям

Волчий клык стойко переносит холод. Его поэтому и советуют для культивирования в северных местностях России. Стойкость к жаре не описана. Однако вряд ли она принципиально выше, чем у большинства обычных для России сортов.

Томат Волчий клык

Расширенный поиск   Название: Артикул: Текст: Выберите категорию: Все Овощи » Огурцы »» Огурцы самоопыляемые »» Огурцы пчелоопыляемые » Томаты »» Томаты высокорослые »» Томаты среднерослые »» Томаты низкорослые » Перцы »» Перцы сладкие »»» Перцы высокорослые »»» Перцы среднерослые »»» Перцы низкорослые »» Перец острый, полуострый » Баклажаны » Морковь » Редис » Свекла »» Кормовая свекла »» Столовая свекла » Капуста »» Капуста белокочанная »» Капуста цветная »» Капуста разная » Кабачки и патиссоны » Тыква » Лук » Пряные и зеленые культуры »» Амарант »» Базилик »» Горчица салатная »» Катран »» Кервель »» Кориандр »» Котовник »» Кресс-салат »» Кумин »» Лавр »» Лаванда »» Любисток »» Майоран »» Мелисса »» Монарда »» Мята »» Пажитник »» Пастернак »» Перилла »» Петрушка »» Портулак »» Розмарин »» Рута »» Рукола »» Салат »» Сельдерей »» Солянка »» Тмин »» Травы Кухонные »» Травы для чая »» Укроп »» Фенхель »» Хризантема »» Цикорий салатный »» Чабрец »» Черемша »» Шпинат »» Щавель »» Эндивий »» Эстрагон » Овощи (разное) »» Арбуз »» Артишок »» Бобы »» Брюква »» Горох »» Дайкон »» Дыня »» Картофель »» Кукуруза »» Мангольд »» Подсолнечник »» Редька »» Репа »» Ревень »» Спаржа »» Турнепс »» Фасоль »» Физалис овощной »» Чечевица »» Экзотика Цветы » Цветы однолетние »» Астры однолетние »» Агератум »» Амарант »» Бальзамин »» Бархатцы »» Бегония »» Брахикома »» Васильки »» Вербена »» Вьюнок »» Гацания »» Гвоздика китайская »» Гелихризум »» Георгины однолетние »» Гилия »» Гипсофила изящная »» Годеция »» Датура »» Диморфотека »» Доротеантус »» Душистый горошек »» Иберис »» Ипомея »» Календула »» Калибрахоа »» Капуста декоративная »» Катарантус »» Клеома »» Кобея »» Колеус »» Кореопсис однолетний »» Космос »» Лаватера »» Лагенария »» Левкой »» Лен »» Лимониум »» Лобелия »» Лобулярия »» Львиный зев »» Малопа »» Настурции »» Петунии »» Подсолнечник »» Табак душистый »» Флоксы »» Цинния »» Хризантема »» Эустома »» Эшшольция »» Другие однолетники » Цветы многолетние » Цветы двулетние »» Виола »» Гвоздика »» Другие двулетники »» Мальва (Шток-роза) »» Маргаритка »» Наперстянка »» Незабудка » Декоративные смеси цветов »» Декоративные смеси однолетних цветов »» Декоративные смеси многолетних цветов » Комнатные растения Лекарственные растения Ягоды Газоны » Цветочные газоны » Газонные травы Сидераты Табак курительный Производитель: ВсеMegaSAKATASeminisа/ф Семена АлтаяАгрофирма «Наш Сад»Агрофирма «Семцветовощ»Агрофирма «Партнер»Агрофирма «Урожай уДачи ® »Агрофирма АэлитаАгрофирма БелогоркаАгрофирма БиотехникаАгрофирма КосмеяАгрофирма ЛетоАгрофирма МанулАгрофирма СеДеКАгрофирма Сибирский садАгрофирма ХардвикБольшая полянкаВНИИ селекции и семеноводстваГруппа компаний «Гавриш»ЗАО Фирма «Август»ЗАО «ПРОМЭКС»ЗАО «ТПК Техноэкспорт»ЗАО «ФЕРТИКА»ЗАО ССПП «Сортсемовощ»ННПП «НЭСТ М»НПФ «Агросемтомс»ООО «Ваше хозяйство»ООО «НВП БашИнком»ООО «ОРТОН»ООО «ПРЕСТИЖ-СЕМЕНА»ООО «ФАСКО+»ООО «Фирма «Зеленая аптека садовода»Селекционно-семеноводческая агрофирма ИльиничнаСемена от Шашиловойтм ВестаТомАгроС- авторские семенаУральский дачникФлор-Экспресс (Нидерланды) ОПТОМ: Вседанет Выгодно!: Вседанет Профессиональные: Вседанет Мини Профи: Вседанет Профи: Вседанет Эконом: Вседанет Новинка: Вседанет Спецпредложение: Вседанет Результатов на странице: 5203550658095 Найти Каталог товаров

Артикул: 20 12. 2023 Низкорослый  для  открытого грунта, Ранний, Урожайный. Очень урожайный, с  длительным периодом плодоношения и дружной  отдачей первой волны раннего урожая.  Хорошо переносит понижение температур. Растение  детерминантное, высотой до 0,6м, выращивается с   минимальным  формированием. Томаты  изящной сердцевидно-перцевидной формы, с плотной глянцевой кожицей красного цвета, сочные, с высоким содержанием сахаров, массой  120-170 грамм. Круглое  лето  используются  в  свежих   салатах  и  прекрасно подходят для  зимних заготовок. Назад

Семена Томат Волчий Клык,Сиб Сад. 20с.

Низкорослый для открытого грунта, Ранний, Урожайный. Очень урожайный, с длительным периодом плодоношения и дружной отдачей первой волны раннего урожая. Хорошо переносит понижение температур. Растение детерминантное, высотой до 0,6м, выращивается с минимальным формированием. Томаты изящной сердцевидно-перцевидной формы, с плотной глянцевой кожицей красного цвета, сочные, с высоким содержанием сахаров, массой 120-170 грамм. Круглое лето используются в свежих салатах и прекрасно подходят для зимних заготовок.

Правила посадки 

Выращивание томатов – дело кропотливое. А все потому, что растения выращивают рассадным способом. Рассмотрим основные этапы: 

• Посевной материал прогревают, замачивают в марганцовке, после этого промывают в чистой воде. Обрабатывают стимуляторами роста.  

• Семена закладывают в контейнеры в конце марта и начале апреля. Можно использовать торфяные таблетки для быстрого проращивания.

• Субстрат подбирают питательный, обеззараженный. Его можно подготовить и самостоятельно: обезвоженный торф + измельченный перегной + глина + сосновая кора + песок. 

• Семена закладывают на расстоянии 5 см друг от друга, присыпают почвой слоем 0,5 см. Орошают через пульверизатор. Горшок накрывают пленкой. 

• Первые всходы появляются спустя 5-7 дней. 

• Пленку убирают, горшки переносят в светлое место, обеспечивают температуру воздуха + 15 градусов. 

• Полив осуществляют отстоянной водой. 

• По мере роста сеянцев следует подсыпать грунт в контейнеры, что положительно скажется на внешнем виде растения. 

• Пикируют помидоры в период появления 2 настоящих листьев. Подбирают подходящие по размеру горшки. 

• Рассаду в открытый грунт высаживают в начале мая, когда отступили заморозки, а t воздуха не опускается ниже + 14 градусов. Земляной ком разрушать нельзя, переносить растение вместе с ним.

• В зависимости от сорта томаты подвязывают, обрывают боковые стебли, устанавливают опоры. Собирают урожай в определенный период.

Заказывайте семена помидоров и томатов уже сейчас. Подготовьтесь к периоду посадки заранее!       

Купена – «волчий ландыш». Именно под таким названием я с этим растением познакомилась | Огород в Лесу

Купена для меня всегда была растением из сказки. Ее изогнутые стебли очень элегантны, а цветы похожи не то на крупные ландыши, не то на маленькие колокольчики

Купена для меня всегда была растением из сказки. Ее изогнутые стебли очень элегантны, а цветы похожи не то на крупные ландыши, не то на маленькие колокольчики

Такое сказочное, волнующее название растения в детстве меня просто поразило. Но при этом показалось вполне логичным – для людей ландыши должны быть небольшие, а для волков – гораздо крупнее. В несколько раз.

Странно, но потом я этого названия купены практически не встречала. Хотя и более распространенные названия – и собственно «купена» и «соломонова печать» тоже довольно таинственные. На самом деле народных названий у купены много – это не только «соломонова печать», но и «печатка», «волчий клык», «глухой ландыш», «кокорник»… Но вот «волчьего ландыша» – я потом практически не встречала. Видимо кто-то завез это название к нам в дачную деревню, откуда – теперь уже сложно понять.

Растение очень элегантное, не совсем обычное – купена действительно похожа на гигантский ландыш и декоративна весь сезон. Особенно – весной и осенью. Кроме того, оно замечательно подходит для тенистого сада.

Интересно, что купена относится к семейству спаржевых – не самому распространенному семейству в наших садах.

Растение это довольно неприхотливое, у нас купена много лет растет рядом с елкой, причем умудрилась залезть даже под еловые лапы.

На нашем тенистом, прохладном и сыром участке купена вырастает довольно высокой и хорошо разрастается

На нашем тенистом, прохладном и сыром участке купена вырастает довольно высокой и хорошо разрастается

Так как корни купены расположены поверхностно и горизонтально – то купена стремиться расползтись – это единственное, за чем мы следим у нашей купены. Заодно получается новый посадочный материал.

Теоретически купену можно вырастить из семян, практически мало кто этим занимается, она и так очень хорошо размножается делением корневища.

Но и семенной способ размножения купены был опробован на нашем участке, правда не садоводами-любителями, а, скорее всего муравьями. Время от времени я стала обнаруживать небольшие молодые растения купены в тех местах, куда я ее точно никогда не сажала. И никто не сажал. Самосевом семена туда попасть не могли – слишком далеко от материнского куста. Остается предположить, что семена перемещают по участку другие, более мелкие обитатели нашего сада.

Кстати, аквилегия и печеночница бродят у нас по участку довольно активно!

В наших условиях купена цветет в конце мая-начале июня.

Никакого специального ухода она не получает, — немного прополки, да и то не всегда. Корни купены образуют довольно плотную дернину, которая сорнякам не нравится.

Зимует прекрасно, даже в те года, когда у нас на участке еще не было дренажа и многие растения вымокали. Правда мы ее сразу посадили на приподнятую клумбу.

Еще один пик декоративности, увы, короткий у купены осенью. Ее листья окрашиваются в очень нарядный золотисто-желтый цвет

Еще один пик декоративности, увы, короткий у купены осенью. Ее листья окрашиваются в очень нарядный золотисто-желтый цвет

Для нашего тенистого, прохладного и влажного участка купена оказалась совершенно беспроблемным растением. Пользуется она популярностью и в соседних садовых товариществах, деревнях и поселках, причем иногда растет на довольно солнечных клумбах. Поливают ее там в жару или нет я не знаю, но скорее всего — поливают заодно с ее соседями.

Вроде бы совершенно обычное, довольно распространенное в наших краях растение, но для меня все равно купена остается растением из детской сказки – гигантскими ландышами для волков.

Если вам понравился материал — ставьте лайки. Если есть вопросы — задавайте их в комментариях.

П.С. Все фотографии и материалы в статье – авторские. Перепечатка фотографий без согласия автора запрещена, при цитировании материала обязательна ссылка на канал.

Growing the Velvet Leaf Felt Plant

Каланхоэ , [kal-un-KOH-ee] [be-HAIR-en-sis], представляет собой медленнорастущий суккулент.

Часть «бахаренсис» относится к родному региону растения Бехара на юге Мадагаскара.

Pin

Факты о растении Kalanchoe Beharensis

• Происхождение: Мадагаскар
• Семейство: Crassulaceae
• Ботаническое название: Kalanchoebeharensis , [kal-un-KOH-ee] [be-HAIR] [be-HAIR] [be-HAIR] sis]
• Общее название: Уши слона Каланхоэ, растение с бархатными листьями, войлочный куст
• Тип растения: суккулентный многолетник
• Размер: от 10 футов до 12 футов в высоту
• Листья: треугольные, бархатистые покрытие
• Цветы: редко
• Выносливость: Зоны устойчивости USDA от 11 до 12
• Выдержка: Полное солнце, полутень
• Почва: Хорошо дренируемая кактусовая почва
• Вода: продолжать сухая сторона НЕ поливать
• Удобрение: легкие жидкие удобрения весной и летом
• Размножение: черенков

Каланхоэ B eharensis Care

Растение принадлежит к роду суккулентов Kalanchoe и семейству Crassulaceae . Хотя барансис — сочный кустарник, в дикой природе он может достигать высоты от 10 до 12 футов. Из-за формы и размера листьев он получил общие названия:

• Velvet Elephant Ear Succulent Kalanchoe
• Velvet Leaf Kalanchoe plant
• Felt Bush

Независимо от того, выращено ли оно в помещении или на открытом воздухе, Kalanchoebeeberensis fang является Выносливое растение, за которым легко ухаживать. Растение иногда упоминается или выращивается как Kilchingia mandrakensis.

Что такое размер и рост Beharensis?

Этот древовидный суккулент может достигать высоты и ширины 12 футов, что делает его большим суккулентом и самым крупным видом каланхоэ. Это медленнорастущее растение, которому требуются годы, чтобы созреть. Однако это морозостойкое растение.

Хотя он может достигать огромной высоты и ширины, он редко достигает таких размеров за пределами своего родного региона.

При выращивании в США он с большей вероятностью достигнет максимальной высоты от трех до четырех футов и ширины от двух до трех футов.

Растение медленно растет, образуя треугольные листья с длинными черешками.

Верхняя часть зрелых листьев имеет бронзовый цвет, а нижняя сторона обычно серебристо-серого цвета. Вы также заметите много тонких волосков на стеблях и клыках листвы.

Как часто цветет каланхоэ Beharensis?

Выращивание слоновьих ушей Клык каланхоэ за пределами его родного региона также может повлиять на его цветение. На самом деле, велика вероятность, что вы не увидите цветов.

Если растение дает цветы, они должны зацвести весной.

Взрослые растения могут давать длинные грозди цветов. Эти цветы имеют форму урны с оттенками красновато-оранжевого и зеленовато-желтого цветов.

Какое освещение и температура любит войлочный завод?

Каланхоэ бахаренсис погибнет, если температура станет слишком низкой. Не морозоустойчив!

Растение рекомендуется для зон устойчивости USDA с 11 по 12. Поскольку растение родом из Мадагаскара, лучше всего оно растет в теплых регионах.

Если температура упадет ниже 55 градусов по Фаренгейту, растение может начать проявлять признаки бедствия.

Он должен получать много солнечного света (полное солнце), особенно летом, когда растение имеет тенденцию к большему росту. Зимой солнечный свет менее важен. Однако растению все же требуется хоть какое-то частичное солнце.

Как поливать и кормить Beharensis?

Поливать это растение — не обычная задача. Как и большинство суккулентов, Каланхоэ устойчиво к засухе, и между поливами следует давать ему подсохнуть.

Зимой поливать растение нужно редко. Вам нужно добавить столько воды, чтобы почва оставалась слегка влажной.

Рекомендуется удобрение. Однако в этом нет необходимости, если растение получает оптимальное количество солнечного света и достаточное количество воды.

Если вы все же решили добавить удобрение, добавляйте его весной и летом.

Вы можете добавлять его примерно раз в месяц в эти сезоны, но избегайте добавления удобрений зимой, когда растение не требует такого количества питательных веществ.

Советы по почве и пересадке

Каланхоэ из войлока следует сажать в хорошо дренирующийся кактус. Растение хорошо себя чувствует даже на бедных почвах.

На самом деле, если почва густая и похожая на глину, добавьте гальку или сочную почвенную среду, чтобы улучшить дренаж.

Держите растения на расстоянии не менее 24 дюймов друг от друга, чтобы им было достаточно места для распространения. Если вы сажаете в контейнер, используйте большой горшок или контейнер, чтобы дать растению достаточно места.

ПРИМЕЧАНИЕ: Не забывайте перемещать контейнеры или горшки в помещении, когда на улице становится холодно.

Grooming Felt Beharensis Plant

Растение медленнорастущее. Вам не нужно ухаживать за ним. Однако, если вы хотите, чтобы растение не становилось слишком высоким или широким, вы можете обрезать нижние листья по мере необходимости.

Как разводить каланхоэ Beharensis

Наилучший способ размножения каланхоэ бехаренсис — это сбор семян или стеблевых черенков. Затем эти семена можно посадить весной в небольшой контейнер с песчаной почвой или перлитом.

Размножение каланхоэ из слоновьих ушей из стеблей или листовых черенков

Размножение войлочного растения несложно.Выполните следующие действия:

• Удалите листья весной или в начале лета.
• Дайте черенкам листьев высохнуть в течение нескольких дней или даже недели.
• Поместите мясистые листья, листовые пластинки или черенки стебля в горшок с песчаной почвой.
• Поставьте горшок на яркий свет, но не на солнце.

Черенки должны начать укореняться примерно через 3-4 недели. После появления корней должны начать расти новые листья.

Как только начнутся новые ростки, переместите новые молодые растения в горшки большего размера.После того, как растения укоренились и немного выросли, их можно высаживать на открытом воздухе, в зависимости от региона, в котором вы живете.

Вредители, болезни или проблемы, с которыми может столкнуться растение

Как и большинство разновидностей каланхоэ, berensis подвержен ряду угроз, включая чрезмерный полив. При чрезмерном поливе листья могут начать гнить. Однако вам также нужно остерегаться тварей.

Тля и мучнистый червец похожи на листья этого суккулента. Используйте ваш любимый спрей от вредителей (мы любим ним), чтобы эти насекомые не уродовали листья.

Какие сорта каланхоэ самые популярные?

Помимо каланхоэ бахаренсис, есть несколько других разновидностей каланхоэ этого рода, которые вы можете попробовать, в том числе следующие:

Как лучше всего использовать в помещении или на улице вы живете в подходящем регионе, например, в Аризоне или некоторых частях Калифорнии, Техаса и южной Флориды.

В более прохладных или влажных регионах растения лучше растут в помещении или в контейнерах, поэтому перемещайте растения в закрытые помещения, когда становится прохладнее.

В контейнере растение представляет собой отличный декоративный элемент, и его можно размещать на полном или частичном солнечном свете.

Толстые, треугольные, серебристо-коричневые бархатистые листья делают пейзаж интересным.

Отравление монашеством (волчий отравой)

Монашество ( Aconitum napellus ), также называемое Wolfsbane, изображено здесь растущим в кустах боярышника. Это очень ядовитое растение. Аконитин, мезаконитин, гипаконитин и другие алкалоиды содержат сильнодействующие кардиотоксины и нейротоксины, обнаруженные во всех частях видов Aconitum, особенно в клубнях и корнях.Латинское название Aconite происходит от греческого ἀκόνιτον, что означает «без праха» и «без борьбы». Его использовали в качестве яда для наконечников стрел при охоте на волков (отсюда и волчий отрав), и, поскольку он очень быстро действует, он, вероятно, упал в пыль без борьбы

Нейротоксины, аконитин и мезаконитин могут всасываться через кожу и вызывать серьезные респираторные и сердечные проблемы. Поэтому не собирайте и не трогайте это растение без перчаток, особенно за корень.

Общие признаки отравления монахами включают покалывание, онемение языка и рта, тошноту с рвотой, дыхание становится затрудненным и затрудненным, пульс и сердцебиение становятся слабыми и нерегулярными, кожа холодная и липкая.

Пациенты с внутренним отравлением Aconitum будут иметь сердечно-сосудистые (замедление и остановку сердца), неврологические (боль, судороги, паралич), желудочно-кишечные симптомы (тошнота и рвота), а также часто другие признаки (например, может возникнуть спутанность сознания и мания. если алкалоиды достигают мозга).Вероятна полиорганная недостаточность. При вскрытии обнаруживается, что уровень алкалоида Aconitum выше всего в печени и почках и ниже в сердце и головном мозге, причем последний уровень ниже, чем в крови (Niitsu et al, 2012). Прилагаемые диаграммы показывают распределение алкалоидов в органах при вскрытии.

Расчетная летальная доза составляет 2 мг аконитина, 5 мл настойки аконита и 1 г сырого растения аконита (Chan, 2012; Qin et al., 2012). Доза аконитина 2 мг может вызвать смерть в течение 4 часов.К счастью, случаи смертельного отравления монахами редки, так как оно имеет неприятный и горький вкус, и его быстро выплюнут.

Противоядия не существует.

Помимо уже упомянутых токсинов аконитина, мезаконитина и гипаконитина, ядовитое монашество также содержит по крайней мере дюжину других ядовитых соединений, дитерпеноидных алкалоидов, джезаконитина, ликоктонина, неопеллина, неолина, бензоилаконинов и аконинов. Так что не ребенок, с которым можно связываться. Избегайте сбора дикого букета, чтобы забрать его домой !!

Одним из древних общеизвестных названий монашества была Колесница Венеры, поэтому ее, возможно, использовали в языческих летучих мазях.Так называемые «летающие мази» якобы использовались ведьмами (отсюда летающими на метлах (деревянных фаллоимитаторах)), когда на кожу наносили бальзам или мазь, содержащую ядовитую траву, чтобы контролировать дозу. Убедительных доказательств этому, как вы понимаете, нет. Цель заключалась в том, чтобы помочь шаману или ведьме отравить опасные травы, получить кайф для визионерских или мистических путешествий, избегая при этом некоторых фатальных эффектов. Не пытайтесь делать это дома, так как всего 2 миллиграмма аконитина смертельны. Опасные игры!

Недавно (отчет по расследованию, июнь 2015 г.) в СМИ появилась печальная новость о смерти Натана Гринуэя (7 сентября 2014 г.), садовника, который умер от полиорганной недостаточности.Он якобы преодолел большую часть монашества (27 августа), но не справился ни с чем из этого — насколько известно. Коронер постановил, что его смерть наступила по необъяснимым причинам.

В случае Натана, поскольку смерть наступила примерно через 10 дней после появления симптомов, отравление монашеством было исключено, поскольку смертельные эффекты монашества обычно происходят мгновенно. Также некоторые из симптомов не соответствовали ожидаемым. Например, сообщалось, что он был «весь в поту» — это липкость, связанная с отравлением Aconitum или вирусный пот?

Ричард Гринуэй, отец Натана, который расследовал и установил связь с отравлением монахами, думал, что виновато растение.Асмат Мустаджаб, гистопатолог, вызвавший предварительное слушание, также считает, что aconitum «скорее всего, чем нет» сыграл ключевую роль в смерти Натана

К сожалению, образцы крови, взятые при его поступлении в больницу, были уничтожены, несмотря на то, что на них была пометка «Для хранения». Поскольку аконитины наносят ущерб сразу же, но покидают организм в течение 24 часов, теоретически возможно, что более поздний анализ не смог обнаружить аконитины — тем более, что их не искали в то время, поскольку они думали, что у него может быть Эбола или другой вирус.

Современная интенсивная терапия также может продлить жизнь пациентам, даже если они получили серьезное повреждение органов.

Я не располагаю полными фактами и просто делаю предположения с позиции одетой в форму, но лично я подумал бы, что Натан мог умереть, если бы он имел дело с растениями. Возможно, его не заметили, обращаясь с ними; если бы он много работал и вспотел, поры его кожи были бы открыты; в большом поместье «столкновение с колонией монашества» (а не просто одно или два растения) могло иметь кумулятивный эффект; нам не сообщается, как долго листья контактировали с его кожей.Но меня там не было, и я не видел отчета о расследовании, поэтому в данном случае мы должны сделать вывод, что Натан, должно быть, умер по другой причине. Мои мысли очень сильно связаны с женой, отцом и семьей Натана.

Тем не менее, помните о растении и избегайте контакта с ним, особенно с корнями. Существуют не только анекдотические клинические доказательства того, что он может всасываться через кожу (чрескожное отравление). Один из наших подписчиков в Твиттере @NapiersHerbs сообщил о следующем опыте: «@RavenPulsar: Однажды я забыл надеть перчатки и поднял очень молодое растение с корнем — руки онемели… вымыли руки и, к счастью, все прошло нормально (!)»

Артикул:

Чан, Т.Ю. (2012). Содержание алкалоидов аконита и высокая токсичность настойки аконита. Forensic Sci. Int., 222, 1–3
Niitsu et al. (2012). Распределение алкалоидов Aconitum при вскрытии отравлений аконитом. Forensic Sci Int. 10 (227), (1-3): 111-7. DOI: 10.1016 / j.forsciint.2012.10.021.

Qin, Y., Wang, J., Zhao, Y., Shan, L., Li, B.C., Fang, F., Jin, C., & Xiao, X.H. (2012). Создание биоанализа для оценки токсичности и контроля качества трав Aconitum. J. Hazard. Матер., 199–200 , 350–357

Нравится:

Нравится Загрузка …

Комплексный инструментарий для индуцибельной экспрессии генов, специфичных для клеточного типа, в арабидопсисе | Физиология растений

Аннотация

Понимание контекстно-зависимой роли функции генов — ключевая задача современной биологии. С этой целью мы создали ресурс для индуцибельной типоспецифической трансактивации клеток Arabidopsis ( Arabidopsis thaliana ) на основе хорошо зарекомендовавшей себя комбинации химерного фактора транскрипции GR-LhG4 и синтетического промотора pOp .Используя гибкость системы клонирования GreenGate, мы создали полный набор трансгенных линий, названных линиями драйверов GR-LhG4, нацеленных на большинство тканей в побегах и корнях Arabidopsis, уделяя особое внимание неопределенным меристемам. Когда мы объединили эти трансгенные линии с эффекторами под контролем промотора pOp , мы наблюдали жесткий временной и пространственный контроль экспрессии генов. В частности, индуцируемая экспрессия в растениях F1, полученных при скрещивании линий драйвера и эффектора, позволяет быстро оценить влияние эффектора на тип клетки с высоким временным разрешением.Таким образом, наш комплексный и гибкий метод подходит для преодоления ограничений повсеместных генетических подходов, результаты которых часто трудно интерпретировать из-за широко распространенного существования компенсаторных механизмов и интеграции дивергентных эффектов в разных типах клеток.

Ключом к эволюционному успеху многоклеточности, возникшей независимо у растений и животных, является разделение труда между высокоспециализированными типами клеток. Это требует надежной спецификации клеточной судьбы посредством эпигенетического и транскрипционного программирования, несмотря на идентичный генетический состав каждой клетки.У растений приобретение судьбы клеток основано в значительной степени на позиционной информации, которая зависит от межклеточной коммуникации и от средне-дальних морфогенетических сигналов, которые участвуют в формировании паттерна органов (Efroni, 2018). И наоборот, отдельные гены, пути и метаболиты могут иметь различные или даже противоположные роли в зависимости от тканевого контекста. Ярким примером зависимости от контекста фундаментального процесса формирования паттерна является взаимодействие фитогормонов ауксина и цитокинина (Furuta et al., 2014; Греб и Ломанн, 2016; Трускина, Верну, 2018). В апикальной меристеме побегов, несущей нишу стволовых клеток, в конечном счете ответственную за большинство надземных органов растений, передача сигналов цитокининов связана с поддержанием плюрипотентного, недифференцированного состояния, тогда как передача сигналов ауксина способствует дифференцировке. Напротив, ауксин необходим для поддержания стволовых клеток в апикальной меристеме корня (RAM; Pacifici et al., 2015; Weijers and Wagner, 2016). Следовательно, глобальные эффекты генетических поражений или нокинов могут ослаблять и маскировать определенные функции, и их часто трудно интерпретировать.

Обычно стабильные генетические мутанты с усилением и потерей функции остаются главной опорой редукционистского подхода к биологии, и фенотипы таких мутантов оцениваются, чтобы вывести функцию мутировавшего локуса в диком типе. Однако функция многих генных продуктов зависит от контекста; таким образом, фенотипы мутантов или трансгенных линий могут быть сложными. Кроме того, мутантные организмы могут адаптироваться на протяжении всей жизни, что затрудняет интерпретацию их фенотипа. Более того, трансгенные и мутационные подходы могут повлиять на жизнеспособность растений, что исключает углубленный анализ.

Многие из этих проблем могут быть преодолены с помощью индуцируемой клеточно-специфической экспрессии, опосредованной двухкомпонентными системами активации транскрипции (Moore et al., 2006). Кассета экспрессии конструируется с использованием гетерологичного или синтетического промотора и, следовательно, молчит, если не присутствует родственный фактор транскрипции. Эффективный подход заключается в создании трансгенных растений, называемых линиями-драйверами, которые экспрессируют фактор транскрипции пространственно и временно контролируемым образом, и линией-ответчиком, несущей эффекторную конструкцию.После скрещивания двух линий можно вызвать экспрессию и изучить фенотипические последствия эффектора. Говоря абстрактно, эти системы экспрессии очень ценны, потому что в идеале они обеспечивают комплементацию или нокдаун, специфичную для конкретного типа или стадии клетки, облегчают разнесенный по времени мониторинг ответа на заданный сигнал, могут преодолеть летальность конститутивной экспрессии и позволяют изучать клеточно-автономные и не-клеточно-автономные эффекты с высоким временным и пространственным разрешением.Однако значительные усилия и время, необходимые для клонирования ДНК и создания стабильных трансгенных растений, являются серьезным препятствием, ограничивающим их использование на сегодняшний день. По той же причине, а также из-за того, что в прошлом не всегда были доступны различные тканеспецифические промоторы, внимание обычно уделяется только одной ткани или типу клеток, представляющих интерес, и редко применяются непредвзятые подходы, нацеленные на более широкий спектр отдельных тканей.

Здесь мы сообщаем о создании полного набора драйверных линий Arabidopsis ( Arabidopsis thaliana ), подходящих для тканеспецифической трансактивации эффекторной кассеты в широком диапазоне типов клеток и с возможностью мониторинга активации генов в космосе. и время репортером флуоресцентного промотора.Чтобы обеспечить быструю и стабильную индукцию с минимальными побочными эффектами индуктора на рост растений, наша система использует преимущества широко используемой системы LhG4 / pOp (Moore et al., 1998; Craft et al., 2005; Samalova et al., 2005) в сочетании с лиганд-связывающим доменом глюкокортикоидного рецептора крысы (GR; Picard, 1993; Craft et al., 2005). LhG4 представляет собой химерный фактор транскрипции, состоящий из мутантной версии репрессора Escherichia coli lac с высокой аффинностью связывания ДНК (Lehming et al., 1987) и домен активации транскрипции дрожжевого Gal4p (Moore et al., 1998). N-концевое слияние с лиганд-связывающим доменом GR делает фактор транскрипции неактивным в цитозоле за счет секвестрации HEAT SHOCK PROTEIN90 в отсутствие индуктора. Импорт в ядро ​​после обработки синтетическим глюкокортикоидом дексаметазоном (Dex; Picard, 1993) приводит к транскрипционной активации кассет экспрессии, которые находятся под контролем синтетической регуляторной области Op 5 ‘, состоящей из минимального промотора 35S вируса мозаики цветной капусты (CaMV) и два вышестоящих оператора lac (Мур и др., 1998; Craft et al., 2005). Сочетание множественных вкрапленных повторов операторных элементов ( pOp4 и pOp6 ) и локализованной экспрессии LhG4 обеспечивает сильную сверхэкспрессию целевого гена специфическим для типа клеток образом (Craft et al., 2005).

Наша работа основана на этих основополагающих исследованиях путем создания 19 хорошо охарактеризованных и стабильных линий драйверов, нацеленных на большинство типов клеток у Arabidopsis, с акцентом на трех основных меристемах растения, RAM, апикальной меристеме побегов (SAM) и камбий.Следует отметить, что для некоторых типов клеток, таких как сердцевина в стволе соцветия или клетки перицикла полюса ксилемы в корне, индуцибельные системы экспрессии пока недоступны. Драйверные линии были созданы с использованием быстрой и гибкой системы клонирования GreenGate (Lampropoulos et al., 2013), но они совместимы с любым вектором / трансгенной линией, в которой экспрессия эффектора находится под контролем производных промоторного элемента pOp . (Мур и др., 1998). Важной особенностью наших линий драйверов является наличие флуоресцентного репортера, поддающегося визуализации в реальном времени, что позволяет отслеживать пространственно-временную динамику индукции гена и может служить индикатором любого воздействия на идентичность соответствующей ткани.Точно так же это позволяет нам оценить, влияет ли экспрессия эффектора на транскрипционные схемы, нацеленные на промотор, из которого он экспрессируется. Описанный здесь материал позволяет проверить влияние генетических нарушений в широком репертуаре отдельных тканей на отдельный процесс развития или физиологический процесс. Поскольку трансактивация эффективно происходит в присутствии индуктора в растениях F1, полученных от скрещивания драйвера и эффекторной линии, эффект данной кассеты экспрессии может быть оценен относительно быстро в широком диапазоне типов клеток, демонстрируя полезность этого ресурс для более широкого исследовательского сообщества.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Дизайн линий драйвера с экспрессией GR-LhG4, зависящей от типа клеток

Для создания полного набора линий драйверов, экспрессирующих химерный фактор транскрипции GR-LhG4 под контролем промоторов, специфичных для определенного типа клеток, мы использовали систему клонирования GreenGate типа Golden Gate, которая обеспечивает быструю, модульную и безрубцовую сборку большие конструкции (Engler et al., 2008; Lampropoulos et al., 2013). Наш дизайн включал на той же Т-ДНК кодирующую последовательность для флуоресцентного репортера mTurquoise2 (Goedhart et al., 2012), нацеленный на эндоплазматический ретикулум (ER) посредством трансляционного слияния с N-концевым сигнальным пептидом из сладкого картофеля ( Ipomoea batatas ), спорамином A (SP; Lampropoulos et al., 2013) и мотивом удержания ER His-Asp -Glu-Leu (HDEL) под контролем pOp6 и минимального промотора 35S вируса мозаики цветной капусты ( pOp6 : SP-mTurquoise2-HDEL ; рис. 1). В нашей установке фактор транскрипции GR-LhG4 экспрессируется под контролем тканевого или клеточного промотора.Следовательно, GR-LhG4 активирует экспрессию репортера mTurquoise2 и любого другого эффектора ниже промотора pOp после обработки Dex, особенно в этих тканях (рис. 1). Мы ожидаем, что наибольшая полезность может быть получена от этой системы, если линии, несущие эффекторные кассеты, пересекутся с линиями драйверов, а анализ будет выполнен с растениями F1. Однако возможны и другие режимы, такие как прямое преобразование нескольких линий драйверов или интрогрессия в различные (мутантные) фоны.Примечательно, что даже несмотря на то, что репортер mTurquoise2 экспрессируется из той же самой Т-ДНК, что и GR-LhG4, нет никаких механистических отличий от активации эффектора в транс (Рис. 1).

Рисунок 1.

Обзор Dex-индуцибельной системы GR-LhG4 / pOp. В линиях драйверов экспрессия синтетического фактора транскрипции LhG4 контролируется тканеспецифическим промотором ( pTS ), тогда как трансляционное слияние с лиганд-связывающим доменом крысиного GR предотвращает ядерную транслокацию в отсутствие индуктора (Dex).После скрещивания с эффекторной линией, несущей транскрипционную кассету под контролем элемента pOp и TATA-бокса, содержащего минимальный промотор 35S, и добавления Dex, GR-LhG4 запускает экспрессию эффектора, а также кодируемого репортера mTurquoise2 по линии водителя.

Рисунок 1.

Обзор Dex-индуцибельной системы GR-LhG4 / pOp. В линиях драйверов экспрессия синтетического фактора транскрипции LhG4 контролируется тканеспецифическим промотором ( pTS ), тогда как трансляционное слияние с лиганд-связывающим доменом крысиного GR предотвращает ядерную транслокацию в отсутствие индуктора (Dex).После скрещивания с эффекторной линией, несущей транскрипционную кассету под контролем элемента pOp и TATA-бокса, содержащего минимальный промотор 35S, и добавления Dex, GR-LhG4 запускает экспрессию эффектора, а также кодируемого репортера mTurquoise2 по линии водителя.

Чтобы установить довольно полный набор линий драйверов, мы сначала выбрали соответствующие тканеспецифичные промоторы на основе литературных отчетов и наших собственных данных по экспрессии (Таблица 1). Впоследствии мы создали стабильные трансгенные драйверные линии на фоне Arabidopsis Columbia-0 (Col-0) с использованием 19 специфических промоторов, которые покрывают большинство типов клеток в RAM, SAM и камбии.Ранее было показано, что некоторые из промоторов надежно работают в подходах к неправильной экспрессии, специфичных для определенного типа клеток (Nakajima et al., 2001; Weijers et al., 2006; Mustroph et al., 2009; Miyashima et al., 2011; Roppolo et al. ., 2011; Vatén et al., 2011; Naseer et al., 2012; Cruz-Ramírez et al., 2013; Ohashi-Ito et al., 2014; Wang et al., 2014; Chaiwanon, Wang, 2015; Серрано -Mislata et al., 2015; Vragović et al., 2015; Marquès-Bueno et al., 2016; Siligato et al., 2016; Doblas et al., 2017). Затем мы сгенерировали линии Т3, в которых устойчивость к селективному агенту сульфадиазину оказалась гомозиготной после разделения в виде единого локуса в поколении Т2 на основании анализа устойчивости или стандартного добавления количественной ПЦР в реальном времени (SA-qPCR) (Huang et al., 2013).

Обзор промоторов, использованных в этом исследовании

Таблица 1.

Обзор промоторов, использованных в этом исследовании

Таблица 1.

Обзор промоторов, использованных в этом исследовании

Подтверждение специфичности драйверных линий

Для подтверждения ожидаемых паттернов экспрессии в корне драйверные линии проращивали на среде, содержащей 30 мкм Dex или DMSO, и анализировали с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (CLSM) через 5 дней после прорастания (DAG).В каждом случае мы регистрировали полученную из mTurquoise2 флуоресценцию в продольных оптических срезах корневой меристемы (рис. 2; дополнительный рисунок S1) и, где это уместно, в поперечных сечениях через меристему или зону дифференциации (дополнительный рисунок S2). Для визуализации экспрессии в побеге линии выращивали на почве в условиях длинного дня, а надземную часть растений со стеблями соцветий высотой 15 см погружали либо в водопроводную воду, содержащую 10 мкм Dex (рис. 3), либо только в растворитель. ДМСО (дополнительный рис.S3). Через 24 часа срезы стебля, полученные от руки, окрашивали PI для выделения элементов ксилемы и анализировали с помощью конфокальной микроскопии. Чтобы проанализировать экспрессию в SAM, меристемы соцветий растений высотой 15 см обрабатывали Dex 48 ч перед вскрытием и визуализацией с помощью CLSM, снова используя PI в качестве контрастного окрашивания клеточной стенки (рис. 4). Активности репортерного гена соответствовали ожидаемым моделям и строго зависели от присутствия Dex (дополнительные рисунки S1, S3 и S4). Кроме того, полное отсутствие репортерной активности в тканях, прилегающих к клеткам, в которых ожидалась активность, предполагало, что химерный белок GR-LhG4 не перемещается между клетками.Мы не наблюдали какого-либо отрицательного влияния обработки Dex на рост растений (дополнительный рис. S5).

Рисунок 2.

Анализ индуцированных драйверных линий в корнях проростков. A, схематическое изображение слоев ткани корня. От B до I, индуцированные корни линии драйвера, демонстрирующие флуоресценцию клеточных стенок, окрашенных пропидиумом иодидом (PI), и репортер mTurquoise2 (рис. 1; таблица 1). Указанные промоторы опосредуют экспрессию в дифференцирующейся энтодерме (B; pCASPARIAN STRIP MEMBRANE DOMAIN PROTEIN1 [ pCASP1 ]), клетках-предшественниках флоэмы и соседних клетках перицикла (C; pHISTIDINE PHOSPHOTRANSFERPROTEIN9, , pHISTIDINE PHOSPHOTRANSFER PROTEIN6 [9000] pCASPHOTRANSFER PROTEIN6) клетки (D; pTARGET OF MONOPTEROS5 [ pTMO5 ]), клетки перицикла полюса ксилемы (E; pXYLEM POLE PERICYCLE [ pXPP ]), инициалы стелы, кора / энтодерма, инициалы (CEI) F; pHOMEOBOX GENE8 [ pATHB-8 ]), энтодерма, CEI и QC ([G]; pSCARECROW [ pSCR ]), инициалы стелы, флоэма и прокамбиальные клетки (H; pSMA LIKE5 [ pSMXL5 ]), и прокамбиальные клетки (I; pPHLOEM, ИНТЕРКАЛАТИРОВАННАЯ С XYLEM [ pPXY ]).Флуоресценция PI ложно окрашена в пурпурный цвет, а флуоресценция mTurquoise2 ложно окрашена в зеленый цвет. Штанги = 50 мкм.

Рисунок 2.

Анализ индуцированных драйверных линий в корнях проростков. A, схематическое изображение слоев ткани корня. От B до I, индуцированные корни линии драйвера, демонстрирующие флуоресценцию клеточных стенок, окрашенных пропидиумом иодидом (PI), и репортер mTurquoise2 (рис. 1; таблица 1). Указанные промоторы опосредуют экспрессию в дифференцирующейся энтодерме (B; pCASPARIAN STRIP MEMBRANE DOMAIN PROTEIN1 [ pCASP1 ]), клетках-предшественниках флоэмы и соседних клетках перицикла (C; pHISTIDINE PHOSPHOTRANSFERPROTEIN9, , pHISTIDINE PHOSPHOTRANSFER PROTEIN6 [9000] pCASPHOTRANSFER PROTEIN6) клетки (D; pTARGET OF MONOPTEROS5 [ pTMO5 ]), клетки перицикла полюса ксилемы (E; pXYLEM POLE PERICYCLE [ pXPP ]), инициалы стелы, кора / энтодерма, инициалы (CEI) F; pHOMEOBOX GENE8 [ pATHB-8 ]), энтодерма, CEI и QC ([G]; pSCARECROW [ pSCR ]), инициалы стелы, флоэма и прокамбиальные клетки (H; pSMA LIKE5 [ pSMXL5 ]), и прокамбиальные клетки (I; pPHLOEM, ИНТЕРКАЛАТИРОВАННАЯ С XYLEM [ pPXY ]).Флуоресценция PI ложно окрашена в пурпурный цвет, а флуоресценция mTurquoise2 ложно окрашена в зеленый цвет. Штанги = 50 мкм.

Рисунок 3.

Анализ наведенных приводных линий в штоке. A, схематическое изображение слоев ткани стебля соцветия. От B до I, стебли индуцированной драйверной линии, демонстрирующие флуоресценцию от PI-окрашенных клеточных стенок и репортера mTurquoise2 (рис. 1; таблица 1). Промоторы опосредуют экспрессию в дифференцированной флоэме (B; pALTERED PHLOEM DEVELOPMENT [ pAPL ]), волокнах ксилемы и межпучковых волокнах (C; pNAC ВТОРИЧНОЕ УТЛОЖЕНИЕ СТЕН ПРОДВИЖЕНИЕ3 [ pNST3 ]; pSCR ), камбий (E; pWUSCHEL RELATED HOMEOBOX4 [ pWOX4 ]), ксилемные сосуды (F; pVASCULAR RELATED NAC DOMAIN PROTEIN7 [ pVND7 papidin]; pLTP1 ]), зарождающаяся флоэма (H; pSMXL5 ) и сердцевина (I; pAT2G38380 ).Флуоресценция PI ложно окрашена в пурпурный цвет, а флуоресценция mTurquoise2 ложно окрашена в зеленый цвет. Штанги = 50 мкм.

Рисунок 3.

Анализ наведенных приводных линий в штоке. A, схематическое изображение слоев ткани стебля соцветия. От B до I, стебли индуцированной драйверной линии, демонстрирующие флуоресценцию от PI-окрашенных клеточных стенок и репортера mTurquoise2 (рис. 1; таблица 1). Промоторы опосредуют экспрессию в дифференцированной флоэме (B; pALTERED PHLOEM DEVELOPMENT [ pAPL ]), волокнах ксилемы и межпучковых волокнах (C; pNAC ВТОРИЧНОЕ УТЛОЖЕНИЕ СТЕН ПРОДВИЖЕНИЕ3 [ pNST3 ]; pSCR ), камбий (E; pWUSCHEL RELATED HOMEOBOX4 [ pWOX4 ]), ксилемные сосуды (F; pVASCULAR RELATED NAC DOMAIN PROTEIN7 [ pVND7 papidin]; pLTP1 ]), зарождающаяся флоэма (H; pSMXL5 ) и сердцевина (I; pAT2G38380 ).Флуоресценция PI ложно окрашена в пурпурный цвет, а флуоресценция mTurquoise2 ложно окрашена в зеленый цвет. Штанги = 50 мкм.

Рисунок 4.

Анализ индуцированных линий драйвера в SAM. A, схематическое изображение доменов идентификации ячеек в SAM. От B до G, стебли индуцированной драйверной линии, демонстрирующие флуоресценцию от PI-окрашенных клеточных стенок и репортера mTurquoise2 (рис. 1; таблица 1). Левое и среднее изображения представляют собой максимальные проекции конфокальной стопки, а правые изображения состоят из одного медианного конфокального разреза xy и xz и yz видов стопки.Указанные промоторы опосредуют экспрессию в слое L1 / эпидермисе (B; pMERISTEM LAYER1 [ pML1 ]), домене стволовых клеток (C; pCLV3 ), центральной зоне (D; pREVOLUTA [ pREV ]). ]), периферической зоны (E; БЕЗОВЫХ ЦВЕТОЧНЫХ ОРГАНОВ [ pUFO ]), пограничной области (F; pCUP-SHAPED COTYLEDON [ pCUC2 ]) и зачатков органов (G; pAHP6). . Флуоресценция PI ложно окрашена в пурпурный цвет, а флуоресценция mTurquoise2 ложно окрашена в зеленый цвет.Штанги = 20 мкм.

Рисунок 4.

Анализ индуцированных линий драйвера в SAM. A, схематическое изображение доменов идентификации ячеек в SAM. От B до G, стебли индуцированной драйверной линии, демонстрирующие флуоресценцию от PI-окрашенных клеточных стенок и репортера mTurquoise2 (рис. 1; таблица 1). Левое и среднее изображения представляют собой максимальные проекции конфокальной стопки, а правые изображения состоят из одного медианного конфокального разреза xy и xz и yz видов стопки.Указанные промоторы опосредуют экспрессию в слое L1 / эпидермисе (B; pMERISTEM LAYER1 [ pML1 ]), домене стволовых клеток (C; pCLV3 ), центральной зоне (D; pREVOLUTA [ pREV ]). ]), периферической зоны (E; БЕЗОВЫХ ЦВЕТОЧНЫХ ОРГАНОВ [ pUFO ]), пограничной области (F; pCUP-SHAPED COTYLEDON [ pCUC2 ]) и зачатков органов (G; pAHP6). . Флуоресценция PI ложно окрашена в пурпурный цвет, а флуоресценция mTurquoise2 ложно окрашена в зеленый цвет.Штанги = 20 мкм.

Характеристика активации генов

Затем мы проверили, были ли воспроизведены в нашей установке доза-реакция и динамика индукции, наблюдавшаяся ранее с системой GR-LhG4 (Craft et al., 2005). С этой целью мы прорастили линию драйвера pSCR , обеспечивающую экспрессию GR-LhG4 в QC и энтодерме (Di Laurenzio et al., 1996; Wysocka-Diller et al., 2000) на чашках, содержащих растворитель или 0,1, 1, 10 или 100 мкм Dex. Визуализация репортерной флуоресценции 5 DAG действительно выявила увеличение репортерной активности с увеличением концентрации Dex (рис.5A), аргументируя это тем, что можно точно настроить экспрессию генов, регулируя уровни индуктора. Мы заметили, что клетки QC демонстрируют заметно более сильную флуоресценцию по сравнению с энтодермой, предположительно отражая более высокую стабильность промотора GR-LhG4 / репортера в QC, поскольку этого не наблюдалось с ранее опубликованными линиями, использующими тот же фрагмент промотора (Gallagher et al., 2004; Heidstra et al., 2004; Cruz-Ramírez et al., 2013). Поэтому мы количественно оценили флуоресценцию отдельно в клетках QC и инициалах энтодермы (рис.5, В и Г). В то время как QC не показал значительной разницы в интенсивности флуоресценции между любыми видами лечения (фиг. 5C), интенсивность флуоресценции эндодермы коррелировала с концентрацией индуктора до тех пор, пока насыщение не достигло значения Dex от 10 до 100 мкм (фиг. ). Следовательно, мы пришли к выводу, что для точной настройки экспрессии генов путем применения различных концентраций Dex необходимо определить соответствующий диапазон концентраций для каждого промотора и типа клеток индивидуально.

Рис. 5.

Анализ зависимости реакции от дозы и времени корней проростков драйверной линии. A. Линия драйвера pSCR была выращена на 0, 0,1, 1, 10 и 100 мкм Dex и отображена 5 DAG. B: Динамика индукции линии драйвера pSCR в течение 1, 6 и 24 часов с 10 мкм Dex. Прутки = 50 мкм. C. Количественная оценка дозовой реакции интенсивности флуоресценции mTurquoise2 в клетках QC и CEI (клетки, обведенные белым цветом в A). D, Количественная оценка интенсивности флуоресценции mTurquoise2 первых трех энтодермальных клеток после CEI (клетки, обведенные синим цветом в A).E, Количественная оценка динамики индукции (B) в клетках QC, CEI и первых трех энтодермальных клетках. Значительные различия между C и E основаны на результатах двустороннего теста Стьюдента t с P <0,05 (a), P <0,01 (b) и P <0,001 (c), n = от 3 до 6 корней каждый. AU, условные единицы.

Рис. 5.

Анализ зависимости реакции от дозы и времени корней проростков линии драйвера. A. Линия драйвера pSCR выросла на 0, 0.1, 1, 10 и 100 мкм Dex и изображение 5 DAG. B: Динамика индукции линии драйвера pSCR в течение 1, 6 и 24 часов с 10 мкм Dex. Прутки = 50 мкм. C. Количественная оценка дозовой реакции интенсивности флуоресценции mTurquoise2 в клетках QC и CEI (клетки, обведенные белым цветом в A). D, Количественная оценка интенсивности флуоресценции mTurquoise2 первых трех энтодермальных клеток после CEI (клетки, обведенные синим цветом в A). E, Количественная оценка динамики индукции (B) в клетках QC, CEI и первых трех энтодермальных клетках.Значительные различия между C и E основаны на результатах двустороннего теста Стьюдента t с P <0,05 (a), P <0,01 (b) и P <0,001 (c), n = от 3 до 6 корней каждый. AU, условные единицы.

Для дальнейшей оценки кинетики индукции драйверную линию pSCR проращивали на планшетах с контрольной средой и переносили на планшеты, содержащие 50 мкм Dex, через 5 дней. Как и ожидалось, увеличение активности репортера в зависимости от времени наблюдалось в течение 24 часов (рис.5Б). Комбинированная количественная оценка флуоресценции в QC и инициалах энтодермы выявила репортерную активность через 6 часов после индукции (рис. 5E), а значения активности были близки к значениям конститутивной обработки Dex через 24 часа (рис. 5, D и E). Эти наблюдения показали, что 6 часов достаточно, чтобы обеспечить ядерный импорт GR-LhG4, индукцию транскрипции гена и начальную трансляцию белка, и что в течение 24 часов уровни белка достигли стабильного уровня. Кроме того, 5-дневные корни, которые были индуцированы на 2, 3 или 4 DAG, показали схожую репортерную активность, демонстрируя, что реакция на индуктор является устойчивой (дополнительный рис.S6). Для оценки кинетики экспрессии репортера после удаления индуктора мы проращивали линию pSCR > GR> mTurquoise2 на среде, содержащей Dex, и переносили проростки на среду 2 DAG, не содержащую Dex. Количественная оценка репортерной флуоресценции показала, что через 1 день после переноса интенсивность флуоресценции была неотличима от таковой у контрольных растений, перенесенных на чашки с индуктором, но снижалась в течение следующих 2 дней до трудно определяемых уровней (дополнительный рис.S7).

Для оценки уровня транскрипции, опосредованной системой GR-LhG4 / pOp, мы использовали линию, экспрессирующую ИНГИБИТОРА ПЕКТИНМЕТИЛЭСТЕРАЗЫ 5 ( PMEI5 ; Wolf et al., 2012) под контролем сильного и почти повсеместного Промотор 35S ( p35S : PMEI5 ). При сравнении корней из линии p35S : PMEI5 с корнями из обработанной Dex линии GR-LhG4 / pOp, обеспечивающей экспрессию той же кодирующей последовательности PMEI5 в клетках перицикла ксилемного полюса (XPP) (обозначенных как pXPP > GR> PMEI5 ; Craft et al., 2005), мы наблюдали уровни транскрипта PMEI5 , подобные или немного превышающие уровни в линии p35S : PMEI5 (дополнительный рисунок S8). И это несмотря на то, что домен экспрессии XPP содержит только приблизительно шесть файлов клеток в молодом корне (дополнительный рис. S2). Таким образом, мы пришли к выводу, что, хотя система GR-LhG4 / pOp активирует транскрипцию очень локально, она может приводить к сильной экспрессии в соответствующих типах клеток.

ER-локализованный репортер mTurquoise2, присутствующий в наших линиях драйверов, транскрибируется с той же Т-ДНК, которая содержит модуль GR-LhG4 (рис.1). Чтобы проанализировать ответ независимой вставки Т-ДНК, несущей элемент pOp6 в транс, мы создали трансгенную линию, несущую ER-целевой репортер mVenus под контролем промотора pOp6 ( pOp6 : SP-mVenus -HDEL ) и пересек его с линией драйвера pSCR . Полученные в результате растения F1 не проявляли никакой репортерной активности при выращивании на чашках без Dex (фиг. 6), что еще раз подтверждает, что система GR-LhG4 / pOp полностью зависит от Dex.После индукции Dex мы визуализировали флуоресценцию mTurquoise2 и mVenus в корне и стебле и наблюдали полное совпадение активности обоих репортеров (рис. 6). Аналогичным образом были созданы трансгенные линии, экспрессирующие нацеленный на ядро ​​тройной слитый белок GFP под контролем промотора pOp6 и скрещенные с линией драйвера pCLAVATA3 ( CLV3 ), опосредующей экспрессию в стволовых клетках SAM (Fletcher et al. ., 1999). Как и ожидалось, после индукции Dex сигнал 3xGFP-NLS наблюдался в узком домене на конце SAM, который также экспрессировал маркер mTurquoise2 (рис.6). Вместе эти наблюдения подтвердили устойчивую и специфическую трансактивацию трансгенов в растениях F1.

Рисунок 6.

Индукция флуоресценции mTurquoise2 и mVenus / 3xGFP в корне, стебле и SAM растений F1 от скрещивания драйверной линии и эффекторной линии. Клетки контрастируют с PI (который в стебле выделяет одревесневшие элементы сосудов и волокна). Каналы флуоресценции имеют ложный цвет. Штанги = 50 мкм для корня и стебля и 40 мкм для SAM.

Рис. 6.

Индукция флуоресценции mTurquoise2 и mVenus / 3xGFP в корне, стебле и SAM растений F1 в результате скрещивания драйверной линии и эффекторной линии. Клетки контрастируют с PI (который в стебле выделяет одревесневшие элементы сосудов и волокна). Каналы флуоресценции имеют ложный цвет. Штанги = 50 мкм для корня и стебля и 40 мкм для SAM.

Индукция VND7 по типу клеток демонстрирует эффективность трансактивации

Чтобы исследовать потенциал наших линий опосредовать экспрессию биологически активного эффектора, мы пересекли линию драйвера pSCR с линией, несущей эффектор VND7 , слитый с доменом активации VP16, способный индуцировать образование сосудов ксилемы в широкий спектр типов клеток (Kubo et al., 2005; Ямагути и др., 2010). Растения F1 выращивали на контрольной среде в течение 5 дней, а затем переносили в среду, содержащую 10 мкМ Dex или растворитель. Через пять дней полностью дифференцированные сосудоподобные элементы можно было наблюдать в энтодерме корня и гипокотиля (рис. 7), тогда как в контрольной группе, обработанной ДМСО, элементы ксилемы были четко ограничены стелой. Эти результаты демонстрируют, что этот ресурс для типоспецифической и индуцибельной трансактивации клеток может быть использован для изучения функции генов с высоким пространственно-временным разрешением.

Рисунок 7.

Типоспецифическая индукция клеток демонстрирует эффективность трансактивации. Растения, экспрессирующие VND7-VP16 в качестве эффектора в энтодермальных клетках ( pSCR > GR> VND7-VP16 ), показывают образование эктопических сосудов (белые стрелки) через 5 дней индукции Dex как в корневой, так и в гипокотильной энтодерме, в отличие от DMSO. -обработанные растения. Утолщение спиральной вторичной клеточной стенки наблюдали после фиксации и очистки образцов и визуализировали с помощью дифференциальной интерференционной контрастной микроскопии.E, Endodermis; Р — перицикл; X, ксилема. Штанги = 20 мкм.

Рис. 7.

Типоспецифическая индукция клеток демонстрирует эффективность трансактивации. Растения, экспрессирующие VND7-VP16 в качестве эффектора в энтодермальных клетках ( pSCR > GR> VND7-VP16 ), показывают образование эктопических сосудов (белые стрелки) через 5 дней индукции Dex как в корневой, так и в гипокотильной энтодерме, в отличие от DMSO. -обработанные растения. Утолщение спиральной вторичной клеточной стенки наблюдали после фиксации и очистки образцов и визуализировали с помощью дифференциальной интерференционной контрастной микроскопии.E, Endodermis; Р — перицикл; X, ксилема. Штанги = 20 мкм.

ОБСУЖДЕНИЕ

В этом исследовании мы объединили доказанную эффективность хорошо зарекомендовавшей себя системы экспрессии GR-LhG4 / pOp (Craft et al., 2005; Rutherford et al., 2005; Samalova et al., 2005) с легкостью клонирования. системой GreenGate (Lampropoulos et al., 2013), чтобы предоставить исчерпывающий набор инструментов для индуцибельной, специфичной для клеточного типа экспрессии у Arabidopsis. Описанные здесь драйверные линии охватывают большую часть известных типов клеток в трех основных меристемах растения: RAM, SAM и камбий.Наш анализ показывает, что эта система обеспечивает устойчивую, регулируемую и устойчивую трансактивацию эффекторов в поколении F1 после скрещивания с растениями, несущими эффектор. Следовательно, создание линии, несущей эффекторную кассету под контролем промотора pOp6 , должно позволить пользователям быстро оценить батарею различных режимов экспрессии для широкого диапазона приложений. В большинстве случаев эффектор может быть кодирующей областью гена, который может быть неправильно экспрессирован пространственно и временно контролируемым образом, но возможны и другие применения, такие как регулируемая (импульсная) экспрессия репортеров, специфический для домена нокдаун с помощью искусственных микроРНК , исследования клеточной комплементации, получение специфичных для клеточного типа транскриптомов / трансатомов / протеомов / эпигеномов или локальная индукция редактирования генома, например, посредством экспрессии рекомбиназы Cre или модулей CRISPR / Cas9 (Birnbaum et al., 2003; Брэди и др., 2007; Диннени и др., 2008; Гиффорд и др., 2008; Мустроф и др., 2009; Дело и Хеникофф, 2011; Hacham et al., 2011; Айер-Паскуцци и др., 2011; Петричка и др., 2012; Фридман и др., 2014; Адриан и др., 2015; Врагович и др., 2015; Efroni et al., 2016; Канг и др., 2017). Таким образом, эта система должна быть ценным инструментом для генерации индуцируемых генетических нарушений, чтобы преодолеть ограничения конечной генетики и изучить генетическую активность в конкретных тканевых контекстах.

Проектирование системы трансактивации

Двухкомпонентные системы трансактивации и химически индуцированной экспрессии генов широко использовались биологами растений в прошлом. Например, большая коллекция линий улавливания энхансеров на основе фактора транскрипции Gal4 дрожжей (Haseloff, 1999; Engineer et al., 2005) является бесценным инструментом для конститутивной тканеспецифической трансактивации у Arabidopsis (Aoyama and Chua, 1997; Sabatini et al., 2003; Weijers et al., 2003, 2005; Swarup et al., 2005). Кроме того, была разработана индуцибельная система, основанная на Gal и родственной вышестоящей последовательности активации (Aoyama and Chua, 1997), но, по-видимому, она вызывает неспецифические дефекты роста (Kang et al., 1999). Трансактивация, основанная на LhG4 (Moore et al., 1998), демонстрирует лишь минимальное пагубное воздействие на развитие растений, тщательно охарактеризована и оптимизирована (Moore et al., 1998, 2006; Baroux et al., 2005; Craft et al., 2005; Rutherford et al., 2005; Samalova et al., 2005) и использовался растительным сообществом в ряде исследований (Schoof et al., 2000; Baroux et al., 2001; Эшед и др., 2001; Хэй и Циантис, 2006; Нодин и Бартель, 2012; Sauret-Güeto et al., 2013; Hazak et al., 2014; Серрано-Мислата и др., 2015; Цзян и Бергер, 2017). Параллельно с разработкой этих инструментов для клеточно-специфической экспрессии был разработан ряд индуцибельных систем, позволяющих контролировать экспрессию генов во времени (Gatz et al., 1992; Weinmann et al., 1994; Caddick et al., 1998 ; Zuo et al., 2000). Впоследствии объединение и оптимизация доступной технологии позволили создать инструменты, обеспечивающие индуцибельную экспрессию в зависимости от типа клетки (Deveaux et al., 2003; Laufs et al., 2003; Майзель и Вайгель, 2004; Craft et al., 2005).

Для создания этого ресурса мы основывались на новаторской предыдущей работе по созданию системы LhG4 в сочетании с лиганд-связывающим доменом GR (Craft et al., 2005), который с тех пор оказался ценным ресурсом (Reddy and Meyerowitz, 2005; Ongaro et al., 2008; Ongaro, Leyser, 2008; Heisler et al., 2010; Jiang et al., 2011; Dello Ioio et al., 2012; Merelo et al., 2016; Caggiano et al. , 2017; Тао и др., 2017). Для генерации наших линий драйверов мы использовали возможности системы клонирования GreenGate (Lampropoulos et al., 2013). Мы смогли быстро и эффективно собрать большое количество конструкций, обойдя узкое место, возникшее ранее из-за сложной генерации больших конструкций ДНК с различными промоторными элементами, кодирующими областями и терминаторами. Таким образом, ограничивающим фактором в создании этого ресурса была трансформация растений и получение гомозиготных трансгенных линий с одной инсерцией.В качестве общего рабочего процесса мы стремились создать не менее 40 трансформантов T1, затем подсчитали коэффициенты сегрегации устойчивости к антибиотикам / гербицидам в поколении T2 и поддержали линии, в которых устойчивость выделялась как единый локус. Эти линии обычно демонстрировали сходные характеристики в отношении ответа на индуктор и уровней экспрессии, достигаемых посредством трансактивации (на основе интенсивности флуоресценции). Тем не менее, экспрессию репортера в любом наборе вновь созданных линий драйверов следует тщательно оценивать и сравнивать с литературой и внутри линий, поскольку интеграция генома в непосредственной близости от эндогенных промоторных и / или энхансерных элементов может влиять на характер экспрессии.Как и ожидалось, мы иногда наблюдали широко распространенное молчание в поколении T2 линий драйверов, которое не коррелировало с каким-либо конкретным элементом ДНК, присутствующим в нескольких конструкциях

Важной особенностью наших линий драйверов является включение репортера, поддающегося визуализации в реальном времени, которые можно использовать для мониторинга индукции и визуализации пространственной области экспрессии. Кроме того, это позволяет нам оценить, влияет ли экспрессия эффектора на транскрипционные схемы того типа клеток, из которого он экспрессируется.Для некоторых приложений внутренний репортер линий драйвера также может служить индуцибельным маркером даже при отсутствии какой-либо дальнейшей эффекторной экспрессии. Мы выбрали mTurquoise2 в качестве флуоресцентного репортера, поскольку его спектральные характеристики делают его совместимым с более широко используемыми зелеными и красными флуорофорами и демонстрирует высокую фотостабильность, быстрое созревание и высокий квантовый выход (Goedhart et al., 2012). Флуоресцентный белок был слит на N-конце с сигнальным пептидом и модифицирован С-концевым мотивом HDEL для обеспечения удерживания в ER, что, по нашему опыту, является предпочтительной субклеточной локализацией для флуоресцентного репортера при поперечных срезах высокодифференцированных клеток шток обязателен.

Характеристики трансактивации

Наша система позволяет строго контролировать экспрессию гена во времени, на что указывает отсутствие экспрессии репортера в отсутствие индуктора Dex. Более того, трансактивированный репортер точно воспроизводил ранее описанные паттерны экспрессии, связанные с соответствующими 5′-регуляторными областями, что позволяет предположить, что химерный фактор транскрипции GR-LhG4 не является мобильным от клетки к клетке. Однако мы заметили, что в некоторых случаях трансактивация приводила к немного отличающимся паттернам экспрессии по сравнению со слияниями той же 5′-регуляторной области с репортерным геном в цис.Например, экспрессия, управляемая промотором CLV3 , казалась более широкой, чем то, что было описано в линиях pCLV3 : XFP , но соответствовала аналогичной трансактивации, управляемой pCLV3 (Serrano-Mislata et al., 2015), возможно, потому что множественные сайты связывания промотора pOp6 увеличивают экспрессию в клетках, где промотор CLV3 является слабо активным. Альтернативно, высокая стабильность белка химерного фактора транскрипции, репортера или обоих может вызывать пролонгированную активность этих белков в клетках, которые уже вытеснены из области стволовых клеток.Эта потенциальная проблема менее актуальна для таких органов, как корень, где клетки одного типа клеток также в значительной степени имеют одинаковую клональную идентичность (Kidner et al., 2000; Costa, 2016).

Наши эксперименты в соответствии с предыдущими результатами показали, что GR-LhG4 / pOp-опосредованная трансактивация может достигать тканеспецифической сверхэкспрессии целевого гена в зависимости от концентрации индуктора. Однако возможность подавления, секвестрации общих факторов транскрипции, необходимых для других процессов с помощью домена активации LhG4, должна быть принята во внимание при очень высоких уровнях экспрессии.В соответствии с предыдущими сообщениями (Craft et al., 2005), наш анализ драйверной линии pSCR выявил линейную дозовую реакцию, по крайней мере, на 2 порядка величины, но на кинетику индукции может влиять геномное расположение трансгена и , таким образом, следует определять эмпирически для каждой линии. Следует отметить, что экспрессия эффекторов с использованием систем LhG4 / pOp может быть подавлена ​​добавлением изопропил-β-d-1-тиогалактопиранозида (Craft et al., 2005), что позволило бы проводить эксперименты с пульсацией.Однако мы не тестировали эффект изопропил-β-d-1-тиогалактопиранозида в наших линиях.

Распределение линий драйверов и конструкций ДНК

Описанные здесь линии, а также конструкции ДНК доступны сообществу по запросу. Хотя GR-LhG4 и ген устойчивости к сульфадиазину экспрессируются конститутивно, следует проявлять осторожность, чтобы амплифицировать семена только из неиндуцированных растений, чтобы минимизировать вероятность индуцирования посттранскрипционного сайленсинга гена за счет высоких уровней экспрессии репортера (Schubert et al., 2004; Abranches et al., 2005).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Клонирование

Все конструкции были получены путем клонирования GreenGate (Lampropoulos et al., 2013) с использованием модулей, описанных в дополнительной таблице S1. Сайты Eco 31I ( Bsa I) промоторов SCR , PXY и WOX4 были удалены с помощью набора QuikChange XL Site-Directed Mutagenesis Kit (Agilent Technologies) с использованием праймеров, перечисленных в дополнительной таблице S1. следуя инструкциям производителя.Сайт Eco 31I промотора ATHB-8 был удален путем амплификации 5′-части промотора до эндогенного сайта рестрикции Eco 31I, который был мутирован путем замены одного основания в праймере. Этот праймер содержал сайт рестрикции Eco 31I в 5′-выступе. 3′-фрагмент промотора был амплифицирован с прямым праймером, направленным против области непосредственно 3 ‘эндогенного сайта Eco 31I (содержащего сайт Eco 31I в 5′-выступе) и обратным праймером, связывающимся с областью непосредственно перед ATG.Два фрагмента амплифицировали отдельно, расщепляли Eco 31I и затем лигировали. Поскольку Eco 31I является ферментом рестрикции типа II, сайт узнавания в выступах праймеров был удален путем переваривания.

Повторяющиеся последовательности промотора pOp увеличивают вероятность событий рекомбинации при амплификации плазмид. Чтобы отличить клоны с более короткими последовательностями pOp , мы разработали праймеры, которые связываются с короткими фланкирующими последовательностями в начале и конце pOp6 ( pOp6 _F, 5′-TGCATATGTCGAGCTCAAGAA-3 ‘; и _RP6 5′-CTTATATAGAGGAAGGGTCTT-3 ‘) для ПЦР-амплификации и оценки размера с помощью гель-электрофореза.Конечные конструкции всегда подтверждали секвенированием в Escherichia coli и Agrobacterium tumefaciens . Случайные рекомбинации были обнаружены только у E. coli .

Растительный материал и условия роста

Все конструкции трансформировали методом окунания в цветочек (Clough and Bent, 1998), модифицированным Zhang et al. (2006) в Arabidopsis ( Arabidopsis thaliana ) Col-0. Трансформированные семена отбирали на чашках Murashige и Skoog половинной прочности, содержащих 1.От 875 до 3,75 мкг / мл ^-1 сульфадиазина или 7,5 мкг мл ^-1 глюфосината аммония. Только отдельные линии интеграции, основанные на коэффициентах сегрегации Т2, были размножены до Т3, из которых были отобраны растения, гомозиготные по устойчивости. Все растения выращивали в условиях длинного дня (16 ч света / 8 ч темноты) при 22 ° C. Для анализа корней растения выращивали вертикально на чашках Murashige и Skoog половинной прочности, содержащих 1% (мас. / Об.) Suc и 0,9% (мас. / Об.) Растительного агара (Duchefa; P1001). Для индукционной обработки на чашки семена высевали на чашки, содержащие Dex (Sigma-Aldrich; D4903) в указанных концентрациях, в то время как такой же объем DMSO (D139-1; Fisher Scientific) добавляли для имитационного контроля.Для эксперимента по трансактивации семена высевали на чашки без Dex, а проростки переносили на чашки, содержащие Dex, через 1, 6 и 24 ч перед визуализацией 5 DAG. Для анализа стебля надземные части растений высотой 15 см погружали на 30 с либо в водопроводную воду, содержащую 10 мкм Dex с 0,02% (об. / Об.) Silwet L-77 (Kurt Obermeier), либо воду с тем же объем ДМСО с 0,02% (об. / об.) Silwet. Через 24 часа были выполнены разрезы ствола свободной рукой с помощью бритвенного лезвия. Срезы переносили в небольшую чашку Петри (35/10 мм; Greiner Bio-One) с 0.25 мг / мл ^-1 PI в течение 5 мин и помещали на предметные стекла микроскопа для визуализации с помощью CSLM. Для визуализации SAM меристемы соцветий 25-30-DAG растений опрыскивали 10 мкм Dex, тогда как равный объем DMSO был добавлен к воде, распыляемой на имитацию контроля. Через 48 ч после обработки меристемы соцветий рассекали путем обрезки стебля, цветков и бутонов. SAM окрашивали в 0,25 мг мл ^-1 PI (Sigma-Aldrich; P4170) в течение 5 минут, помещали в небольшую чашку Петри с 3% (мас. / Об.) Агарозой (35/10 мм; Greiner Bio-One), и визуализируется CLSM.

Микроскопия

Образцы корня

были получены с помощью лазерного сканирующего конфокального микроскопа Leica TCS SP5 с водно-иммерсионным объективом 63x HCX PL APO lambda blue. Флуорофор mTurquoise2 возбуждали аргоновым лазером на длине волны 458 нм, и собирали эмиссию между 460 и 516 нм. Флуорофор mVenus возбуждали на длине волны 514 нм, а эмиссию собирали на длине волны 520-580 нм. Клетки контрастировали с помощью PI (Sigma-Aldrich; P4170) и отображали при 488 нм для возбуждения, а эмиссию собирали между 590 и 660 нм.

Для образцов ствола и SAM использовали конфокальный микроскоп Nikon (Minato) A1 с водно-иммерсионным объективом CFI Apo LWD 25x. Клетки, окрашенные контрастным веществом, отображали при 561 нм для возбуждения и от 570 до 620 нм для эмиссии. Флуоресценцию mTurquoise2 регистрировали с использованием возбуждения на длине волны 405 нм, а эмиссию собирали между 425 и 475 нм. Для экспериментов по трансактивации сигнал 3xGFP-NLS в SAM отображался с длиной волны 488 нм для возбуждения и от 500 до 550 нм для излучения. В корне mVenus возбуждали на длине волны 514 нм, а эмиссию собирали между 500 и 550 нм.

Для визуализации ксилемы растения проращивали на чашках Murashige и Skoog половинной прочности и переносили 5 DAG на 10 мкм Dex- или имитацию раствора, содержащего половинные чашки Murashige и Skoog. Для визуализации формирования эктопической ксилемы растения собирали через 5 дней после индукции и фиксировали в течение ночи в растворе уксусная кислота: этанол 1: 3. Затем их очищали в растворе хлоралгидрат: глицерин: вода 8: 1: 2 в течение не менее 3 часов. Образцы помещали на предметные стекла микроскопа, содержащие 50% (об. / Об.) Раствор глицерина, и изображения в светлом поле получали с использованием микроскопа Axioimager M1, оснащенного AxioCamHRc (Carl Zeiss).

Анализы кПЦР и SA-кПЦР

Анализ экспрессии PMEI5 с помощью кПЦР выполняли, как описано (Wolf et al., 2012). Для SA-qPCR экстракцию растительной ДНК проводили, как описано Allen et al. (2006) и SA-qPCR выполняли, как описано (Huang et al., 2013). Четырехкратную кПЦР выполняли в конечном объеме 12,5 мкл, включая 6,25 мкл ABsolute qPCR SYBR Green Mix (Thermo Scientific), 0,25 мкл каждого праймера (10 мкм) и 2 мкл геномной ДНК (1.6 нг мкл ^-1 ) с различными количествами (0, 1 или 3 мкл) плазмиды (0,1 пг мкл ^-1 ) в качестве ссылки. Ген устойчивости SulfR амплифицировали с помощью праймеров SulfR_Fwd (5′-GCATGATCTAACCCTCTGTCTC-3 ‘) и SulfR_Rvs (5′-GAAGTCACTCGTTCCCACTAG-3’), а последовательность-мишень плазмиды -CTAAC 3’CTC3 ‘ и PL_Rvs (5’-CTGACCGGAAAGTTTGTTATTCG-3 ‘).

Регистрационный номер

Число генов Arabidopsis Genome Initiative, использованных в этом исследовании, следующее: SCR (AT3G54220), ATHB-8 (AT4G32880), XPP (At4g30450), AHP6 (AT1000480100), AT5G61480), TMO5 (AT3G25710), SMXL5 (AT5G57130), CASP1 (AT2G36100), VND7 (AT1G71930), APL (ATG30007000), (ATG30007) ), PMEI5 (AT2G31430), LTP1 (AT2G38540), ML1 (AT4G21750), CLV3 (AT2G27250), REV (AT5G60690), 50 (ATG60690), 50 (ATG60690), 50 UF ).

Дополнительные данные

Доступны следующие дополнительные материалы.

Условия куратора Dive

Следующие фенотипические, генотипические и функциональные термины имеют значение для работы, описанной в этой статье:

БЛАГОДАРНОСТИ

Мы благодарим сотрудников лабораторий Греба, Вольфа и Ломанна, Алексиса Майзеля (все из COS, Гейдельбергский университет, Германия) и Юопа Вермеера (Цюрихский университет, Швейцария) за обсуждение и поддержку.

ЦИТИРОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА

Abranches

R

,

Shultz

RW

,

Thompson

WF

,

Allen

GC

(

2005

)

Области прикрепления матрицы и регулируемое увеличение транскрипции5.

Завод Биотехнология J

3

:

535

—

543

Адриан

Дж

,

Чанг

Дж

,

Балленджер

CE

,

Баргманн

BO

,

Алассимоне

Дж

,

Дэвис

000

, OS

000

Дэвис

Matos

JL

,

Hachez

C

,

Lanctot

A

и др.(

2015

)

Транскриптомная динамика устьичной линии: рождение, усиление и прекращение самообновления популяции

.

Dev Cell

33

:

107

—

118

Aida

M

,

Ishida

T

,

Fukaki

H

,

Fujisawa

H

,

Tasaka

M

орган (

0002 1997

, задействованный в разделении Arabid 3

) : анализ чашевидного мутанта семядолей

.

Растительная ячейка

9

:

841

—

857

Allen

GC

,

Flores-Vergara

MA

,

Krasynanski

S

,

Kumar

S

,

Thompson

Протокол WF

(ДНК

) изменен для быстрой изоляции 2006 из тканей растений с использованием бромида цетилтриметиламмония

.

Nat Protoc

1

:

2320

—

2325

Andersen

TG

,

Naseer

S

,

Ursache

R

,

Wybouw

B

,

Smet

W

,

De

De

De Rybel

0002

000 Ver

000

Geldner

N

(

2018

)

Диффузионная репрессия передачи сигналов цитокининов вызывает энтодермальную симметрию и пассажи клеток

.

Природа

555

:

529

—

533

Aoyama

T

,

Chua

NH

(

1997

)

Опосредованная глюкокортикоидами система индукции транскрипции в трансгенных растениях

.

Завод J

11

:

605

—

612

Baima

S

,

Nobili

F

,

Sessa

G

,

Lucchetti

S

,

Ruberti

I

,

Morelli

гена гомеобокса Athb-8 ограничивается проваскулярными клетками Arabidopsis thaliana

.

Девелопмент

121

:

4171

—

4182

Baroux

C

,

Blanvillain

R

,

Moore

IR

,

Gallois

P

(

2001

)

Трансактивация BARNASE-промотора и побега BARNASE под эмбрионом влияет развитие взрослого растения Arabidopsis

.

Завод J

28

:

503

—

515

Baroux

C

,

Blanvillain

R

,

Betts

H

,

Batoko

H

,

Craft

J

,

000 A

000

000

Мартинес

000

000 Moore

I

(

2005

)

Предсказуемая активация тканеспецифической экспрессии из одного локуса гена с использованием системы трансактивации pOp / LhG4 в Arabidopsis

.

Завод Биотехнология J

3

:

91

—

101

Besnard

F

,

Refahi

Y

,

Morin

V

,

Marteaux

B

,

Brunoud

G

,

000 Porsche

9000 Ro0005 Mirabet

V

,

Legrand

J

,

Lainé

S

и др.(

2014

)

Поля ингибирования передачи сигналов цитокининов обеспечивают устойчивость к филлотаксису

.

Природа

505

:

417

—

421

Бирнбаум

K

,

Shasha

DE

,

Wang

JY

,

Jung

JW

,

Lambert

GM

,

000

Galbraith

2003

)

Карта экспрессии генов корня Arabidopsis

.

Наука

302

:

1956

—

1960

Bonke

M

,

Thitamadee

S

,

Mähönen

AP

,

Hauser

MT

,

Helariutta

Y

, идентификация сосудов Arabis

Природа

426

:

181

—

186

Brady

SM

,

Orlando

DA

,

Lee

JY

,

Wang

JY

,

Koch

J

,

Dinneny

9000

JY Ohler

U

,

Benfey

PN

(

2007

)

Пространственно-временная карта корня с высоким разрешением выявляет доминирующие паттерны экспрессии

.

Наука

318

:

801

—

806

Caddick

MX

,

Гренландия

AJ

,

Jepson

I

,

Krause

KP

,

Qu

N

,

Riddell 9000 9000

, MG

Schuch

W

,

Sonnewald

U

,

Tomsett

AB

(

1998

)

Индуцируемый этанолом генный переключатель для растений, используемый для управления углеродным метаболизмом

.

Nat Biotechnol

16

:

177

—

180

Caggiano

MP

,

Yu

X

,

Bhatia

N

,

Larsson

A

,

Ram

H

,

Ohno

000

CK2 Meyerowitz

EM

,

Jönsson

H

,

Heisler

MG

(

2017

)

Границы типов ячеек организуют развитие предприятия

.

eLife

6

:

e27421

Chaiwanon

J

,

Wang

ZY

(

2015

)

Пространственно-временная передача сигналов брассиностероидами и антагонизм с динамикой стволовых клеток ауксинового образца в корнях арабидопсиса

.

Curr Biol

25

:

1031

—

1042

Clough

SJ

,

Bent

AF

(

1998

)

Цветочный окун: упрощенный метод опосредованной Agrobacterium трансформации Arabidopsis thaliana

.

Завод J

16

:

735

—

743

Costa

S

(

2016

)

Идентификация клетки: вопрос происхождения и соседей

.

Новый Фитол

210

:

1155

—

1158

Craft

J

,

Samalova

M

,

Baroux

C

,

Townley

H

,

Martinez

A

,

Jepson

I Moore

I

(

2005

)

Новые векторы pOp / LhG4 для строгой глюкокортикоид-зависимой экспрессии трансгена в Arabidopsis

.

Завод J

41

:

899

—

918

Cruz-Ramírez

A

,

Díaz-Triviño

S

,

Wachsman

G

,

Du

Y

,

Arteága-Vázquez

M0005

M

R

,

Blilou

I

,

Neef

AB

,

Chandler

V

и др.(

2013

)

Белковая сеть SCARECROW-RETINOBLASTOMA контролирует защитное состояние покоя в организаторе стволовых клеток корня арабидопсиса

.

PLoS Biol

11

:

e1001724

Deal

RB

,

Henikoff

S

(

2011

)

Метод INTACT для клеточной экспрессии генов и профилирования хроматина в Arabidopsis thaliana

.

Nat Protoc

6

:

56

—

68

Dello Ioio

R

,

Galinha

C

,

Fletcher

AG

,

Grigg

SP

,

Molnar

A

,

000 Billemsen

000 Villemsen

Sabatini

S

,

Baulcombe

D

,

Maini

PK

и др.(

2012

)

Петля обратной связи PHABULOSA / цитокинин контролирует рост корней у Arabidopsis

.

Curr Biol

22

:

1699

—

1704

De Rybel

B

,

Möller

B

,

Yoshida

S

,

Grabowicz

I

,

Barbier de Reuille

P

,

Boeren

,

Borst

JW

,

Weijers

D

(

2013

)

Комплекс bHLH контролирует формирование сосудистой ткани эмбриона и неопределенный рост у Arabidopsis

.

Dev Cell

24

:

426

—

437

Deveaux

Y

,

Peaucelle

A

,

Roberts

GR

,

Coen

E

,

Simon

R

,

Mizukami

Mizukami

Murray

JA

,

Doonan

JH

,

Laufs

P

(

2003

)

Переключатель этанола: инструмент для индукции тканеспецифичных генов во время развития растений

.

Завод J

36

:

918

—

930

Di Laurenzio

L

,

Wysocka-Diller

J

,

Malamy

JE

,

Pysh

L

,

Helariutta

Y

000 MG

000 MG

000 MG

0002

,

Feldmann

KA

,

Benfey

PN

(

1996

)

Ген SCARECROW регулирует асимметричное деление клеток, необходимое для формирования радиальной организации корня арабидопсиса

.

Ячейка

86

:

423

—

433

Dinneny

JR

,

Long

TA

,

Wang

JY

,

Jung

JW

,

Mace

D

,

Pointer

000

Brady

SM

,

Schiefelbein

J

,

Benfey

PN

(

2008

)

Идентичность клеток опосредует реакцию корней арабидопсиса на абиотический стресс

.

Наука

320

:

942

—

945

Doblas

VG

,

Smakowska-Luzan

E

,

Fujita

S

,

Alassimone

J

,

Barberon

M

,

Мадрид

,

Мадрид

,

,

Geldner

N

(

2017

)

Контроль диффузионного барьера корня путем связывания пептида, происходящего из сосудистой сети, с рецептором SGN3

.

Наука

355

:

280

—

284

Efroni

I

(

2018

)

Концептуальная основа для перехода идентичности клеток у растений

.

Physioll растительных клеток

59

:

691

—

701

Efroni

I

,

Mello

A

,

Nawy

T

,

Ip

PL

,

Rahni

R

,

DelRose

DelRose

Satija

R

,

Birnbaum

KD

(

2016

)

Регенерация корня запускает эмбрионоподобную последовательность, управляемую гормональными взаимодействиями

.

Ячейка

165

:

1721

—

1733

Инженер

CB

,

Fitzsimmons

KC

,

Schmuke

JJ

,

Dotson

SB

,

Kranz

RG

2005 Gal4000-

Оценка

Оценка

/ GFP / GUS-энхансерная система ловушек в Arabidopsis

.

БМК Завод Биол

5

:

9

Engler

C

,

Kandzia

R

,

Marillonnet

S

(

2008

)

Одноступенчатый прецизионный метод клонирования с высокой производительностью

.

PLoS ONE

3

:

e3647

Eshed

Y

,

Baum

SF

,

Perea

JV

,

Bowman

JL

(

2001

)

Установление полярности в боковых органах растений

.

Curr Biol

11

:

1251

—

1260

Fisher

K

,

Turner

S

(

2007

)

PXY, рецептороподобная киназа, необходимая для поддержания полярности во время развития сосудистой ткани растений

.

Curr Biol

17

:

1061

—

1066

Fletcher

JC

,

Brand

U

,

Running

MP

,

Simon

R

,

Meyerowitz

EM

(

1999

судьбы решения CLAVidATA по решению CLAVIDATA

)

меристемы всходов

.

Наука

283

:

1911

—

1914

Фридман

Y

,

Элькоуби

L

,

Голландия

N

,

Врагович

K

,

Эльбаум

R

,

000

000

Savaldi

Рост корней регулируется разной гормональной чувствительностью соседних клеток

.

Genes Dev

28

:

912

—

920

Furuta

KM

,

Hellmann

E

,

Helariutta

Y

(

2014

)

Молекулярный контроль клеточной спецификации и дифференцировки клеток во время прокамбиального развития

.

Annu Rev Plant Biol

65

:

607

—

638

Gallagher

KL

,

Paquette

AJ

,

Nakajima

K

,

Benfey

PN

(

2004

)

Механизмы, регулирующие перемещение SHORT-ROOT

Curr Biol

14

:

1847

—

1851

Gatz

C

,

Frohberg

C

,

Wendenburg

R

(

1992

)

Строгая репрессия и гомогенная де-репрессия тетрациклином модифицированного промотора CaMV 35S 9000 в интактных растениях.

Завод J

2

:

397

—

404

Gifford

ML

,

Dean

A

,

Gutierrez

RA

,

Coruzzi

GM

,

Birnbaum

KD

(

000, специфическая разработка клеток)

000 Ответы на азотные продукты

000 2008 .

Proc Natl Acad Sci USA

105

:

803

—

808

Goedhart

J

,

von Stetten

D

,

Noirclerc-Savoye

M

,

Lelimousin

M

,

Joosen

L

L

L

L

,

Gadella

TW

Jr ,

Royant

A

(

2012

)

Структурно-управляемая эволюция голубых флуоресцентных белков в сторону квантового выхода 93%

.

Нац Коммуна

3

:

751

Greb

T

,

Lohmann

JU

(

2016

)

Стволовые клетки растений

.

Curr Biol

26

:

R816

—

R821

Hacham

Y

,

Голландия

N

,

Баттерфилд

C

,

Ubeda-Tomas

S

,

Bennett

MJ

,

Saval

Gold Saval

Chory

S

(

2011

)

Восприятие брассиностероидов в эпидермисе контролирует размер корневой меристемы

.

Девелопмент

138

:

839

—

848

Haseloff

J

(

1999

)

Варианты GFP для мультиспектральной визуализации живых клеток

.

Методы Cell Biol

58

:

139

—

151

Hay

A

,

Tsiantis

M

(

2006

)

Генетическая основа различий в форме листьев между Arabidopsis thaliana и его диким родственником Cardamine hirsuta

.

Нат Генет

38

:

942

—

947

Hazak

O

,

Obolski

U

,

Prat

T

,

Friml

J

,

Hadany

L

,

Yalovsky

000

уровней ICR1 генерирует самоорганизующееся распределение ауксина

.

Proc Natl Acad Sci USA

111

:

E5471

—

E5479

Heidstra

R

,

Welch

D

,

Scheres

B

(

2004

)

Мозаичный анализ с использованием отмеченных активационных и делеционных клонов анализирует действие SCARECROW Arabidopsis при асимметричном делении клеток

.

Genes Dev

18

:

1964

—

1969

Heisler

MG

,

Hamant

O

,

Krupinski

P

,

Uyttewaal

M

,

Ohno

C

,

000 Jönsson

000

000 Jönsson

Meyerowitz

EM

(

2010

)

Выравнивание между полярностью PIN1 и ориентацией микротрубочек в апикальной меристеме побегов обнаруживает тесную связь между морфогенезом и транспортом ауксина

.

PLoS Biol

8

:

e1000516

Hirakawa

Y

,

Kondo

Y

,

Fukuda

H

(

2010

)

Передача сигналов пептида TDIF регулирует пролиферацию сосудистых стволовых клеток через ген гомеобокса WOX4 в Arabidops.

.

Растительная ячейка

22

:

2618

—

2629

Huang

Y

,

Yin

X

,

Zhu

C

,

Wang

W

,

Grierson

D

,

Xu

C

2013

)

Стандартное добавление количественной ПЦР в реальном времени (SAQPCR): новый подход к определению количества копий трансгена, позволяющий избежать оценки эффективности ПЦР

.

PLoS ONE

8

:

e53489

Iyer-Pascuzzi

AS

,

Jackson

T

,

Cui

H

,

Petricka

JJ

,

Busch

W

,

000

000

000

000

000

000

000

000

000

000 Tsukagoshi (

2011

)

Регуляторы клеточной идентичности связывают развитие и стрессовые реакции в корне Arabidopsis

.

Dev Cell

21

:

770

—

782

Jiang

D

,

Berger

F

(

2017

)

Гистоновая модификация, связанная с репликацией ДНК, поддерживает молчание гена Polycomb в растениях

.

Наука

357

:

1146

—

1149

Цзян

D

,

Kong

NC

,

Gu

X

,

Li

Z

,

He

Y

(

2011

) гистон-подобные горючие комплексы компасс. -4 триметилирование для контроля перехода цветков и развития растений

.

PLoS Genet

7

:

e1001330

Kang

HG

,

Fang

Y

,

Singh

KB

(

1999

)

Индуцируемая глюкокортикоидами система транскрипции вызывает серьезные дефекты роста у Arabidopsis и индуцирует защитные гены

.

Завод J

20

:

127

—

133

Kang

YH

,

Breda

A

,

Hardtke

CS

(

2017

)

Передача сигналов брассиностероида направляет деление клеток и дифференцировку протофлоэмы в корневой меристеме Arabidopsis

.

Девелопмент

144

:

272

—

280

Kidner

C

,

Sundaresan

V

,

Roberts

K

,

Dolan

L

(

2000

)

Клональный анализ корней линии арабидопсиса подтверждает это положение, а не определение

.

Планта

211

:

191

—

199

Кубо

M

,

Удагава

M

,

Нисикубо

N

,

Хоригути

G

,

Ямагути

M

,

9000 9000 9000

000

Ito2

Fukuda

H

,

Demura

T

(

2005

)

Переключатели транскрипции для формирования сосудов протоксилемы и метаксилемы

.

Genes Dev

19

:

1855

—

1860

Лампропулос

A

,

Sutikovic

Z

,

Wenzl

C

,

Maegele

I

,

Lohmann

JU

000

000000

000

000

Forner

000

2013 новая, универсальная и эффективная система клонирования для трансгенеза растений

.

PLoS ONE

8

:

e83043

Laufs

P

,

Coen

E

,

Kronenberger

J

,

Traas

J

,

Doonan

J

(

цветочных

Uparable ролей раскрыты в ходе разработки 2003

) условное восстановление функции гена

.

Девелопмент

130

:

785

—

796

Lehming

N

,

Sartorius

J

,

Niemöller

M

,

Genenger

G

,

v Wilcken-Bergmann

B

, 1987

)

Взаимодействие спирали распознавания lac-репрессора с lac-оператором

.

EMBO J

6

:

3145

—

3153

Levin

JZ

,

Meyerowitz

EM

(

1995

)

UFO: ген Arabidopsis , участвующий как в развитии меристемы цветка, так и в развитии органов цветка

.

Растительная ячейка

7

:

529

—

548

Lu

P

,

Porat

R

,

Nadeau

JA

,

O’Neill

SD

(

1996

)

Идентификация меристемы L10003-специфичного гена арабского слоя экспрессируется во время формирования эмбрионального паттерна и определяет новый класс генов гомеобокса

.

Растительная ячейка

8

:

2155

—

2168

Mähönen

AP

,

Bishopp

A

,

Higuchi

M

,

Nieminen

KM

,

Kinoshita

K

ä000

000

000

000

000

000

000 Irmakangas

Oka

A

,

Kakimoto

T

,

Helariutta

Y

(

2006

)

Передача сигналов цитокинина и его ингибитор AHP6 регулируют судьбу клеток во время развития сосудов

.

Наука

311

:

94

—

98

Maizel

A

,

Weigel

D

(

2004

)

Индукция экспрессии гена, контролируемая во времени и пространстве у Arabidopsis thaliana

.

Завод J

38

:

164

—

171

Marquès-Bueno

MDM

,

Morao

AK

,

Cayrel

A

,

Platre

MP

,

Barberon

M

,

Caill ,

Jaillais

Y

,

Roudier

F

,

Vert

G

(

2016

)

Универсальный мультисайтовый шлюз-совместимый промотор и коллекция трансгенных линий для функциональной геномики

, специфичной для определенного типа клеток в Arabid.

Завод J

85

:

320

—

333

Merelo

P

,

Ram

H

,

Pia Caggiano

M

,

Ohno

C

,

Ott

F

,

Straub

D

D

Чо

SK

,

Ян

SW

,

Венкель

S

и др. (

2016

)

Регулирование MIR165 / 166 гомеодоменными белками лейциновой молнии класса II и класса III устанавливает полярность листьев

.

Proc Natl Acad Sci USA

113

:

11973

—

11978

Mitsuda

N

,

Iwase

A

,

Yamamoto

H

,

Yoshida

M

,

Seki

M

,

000 T0005000 9000 Ohme

Shinozaki

000 Shinozaki

000 (

2007

)

Факторы транскрипции NAC, NST1 и NST3, являются ключевыми регуляторами образования вторичных стенок в древесных тканях Arabidopsis .

.

Заводская ячейка

19

:

270

—

280

Miyashima

S

,

Koi

S

,

Hashimoto

T

,

Nakajima

K

(

2011

)

Неклеточно-автономное регулирование множественными действиями, зависимыми от микроRNA165 статус дифференциации в корне Arabidopsis

.

Девелопмент

138

:

2303

—

2313

Moore

I

,

Gälweiler

L

,

Grosskopf

D

,

Schell

J

,

Palme

K

(

регулируемая система экспрессии гена

) трансгенные растения

.

Proc Natl Acad Sci USA

95

:

376

—

381

Moore

I

,

Samalova

M

,

Kurup

S

(

2006

)

Трансактивированная и химически индуцируемая экспрессия генов в растениях

.

Завод J

45

:

651

—

683

Mustroph

A

,

Zanetti

ME

,

Jang

CJ

,

Holtan

HE

,

Repetti

PP 9000 DW,

GALBRAIT

Galbraith

Bailey-Serres

J

(

2009

)

Профилирование трансатомов дискретных популяций клеток разрешает изменение клеточных приоритетов во время гипоксии у Arabidopsis

.

Proc Natl Acad Sci USA

106

:

18843

—

18848

Nakajima

K

,

Sena

G

,

Nawy

T

,

Benfey

PN

(

2001

)

Межклеточное движение предполагаемого фактора транскрипции

SHR.

Природа

413

:

307

—

311

Naseer

S

,

Lee

Y

,

Lapierre

C

,

Franke

R

,

Nawrath

C

,

Geldner

Napier

Nawra Диффузионный барьер у Arabidopsis состоит из полимера лигнина без суберина

.

Proc Natl Acad Sci USA

109

:

10101

—

10106

Nodine

MD

,

Bartel

DP

(

2012

)

Материнский и отцовский геномы вносят равный вклад в транскриптом ранних зародышей растений

.

Природа

482

:

94

—

97

Ohashi-Ito

K

,

Saegusa

M

,

Iwamoto

K

,

Oda

Y

,

Katayama

H

,

000 Hib 9000

000 Kojima

000 Kojima

,

Fukuda

H

(

2014

)

Комплекс bHLH активирует деление сосудистых клеток через действие цитокининов в апикальной меристеме корня

.

Curr Biol

24

:

2053

—

2058

Онгаро

V

,

Leyser

O

(

2008

)

Гормональный контроль ветвления побегов

.

J Exp Bot

59

:

67

—

74

Онгаро

V

,

Bainbridge

K

,

Williamson

L

,

Leyser

O

(

2008

)

Взаимодействие между подмышечными ветвями Arabidopsis

.

Завод Мол

1

:

388

—

400

Otsuga

D

,

DeGuzman

B

,

Prigge

MJ

,

Drews

GN

,

Clark

SE

(позиции

0002, инициация REVOL-5)

.

Завод J

25

:

223

—

236

Pacifici

E

,

Polverari

L

,

Sabatini

S

(

2015

)

Перекрестный разговор гормонов растений: стержень роста корней

.

J Exp Bot

66

:

1113

—

1121

Petricka

JJ

,

Schauer

MA

,

Megraw

M

,

Breakfield

NW

,

Thompson

JW

,

9000 Schauer 9000 9000 So0002 Ohler

U

,

Moseley

MA

,

Grossniklaus

U

и др.(

2012

)

Пейзаж экспрессии белков корня Arabidopsis

.

Proc Natl Acad Sci USA

109

:

6811

—

6818

Picard

D

(

1993

)

Стероид-связывающие домены для регуляции функций гетерологичных белков в цис-

.

Trends Cell Biol

3

:

278

—

280

Reddy

GV

,

Meyerowitz

EM

(

2005

)

Гомеостаз стволовых клеток и динамика роста могут быть разделены в верхушке побега Arabidopsis

.

Наука

310

:

663

—

667

Roppolo

D

,

De Rybel

B

,

Dénervaud Tendon

V

,

Pfister

A

,

Alassimone

J

,

000

000 J

,

000

000 J

,

000

000 Jaz5 ,

Stierhof

YD

,

Beeckman

T

,

Geldner

N

(

2011

)

Новое семейство белков опосредует образование полос Каспария в эндодерме

.

Природа

473

:

380

—

383

Резерфорд

S

,

Brandizzi

F

,

Townley

H

,

Craft

J

,

Wang

Y

,

Jepson

I Мур

I

(

2005

)

Улучшенные активаторы транскрипции и их использование в ловушках неправильной экспрессии у Arabidopsis

.

Завод J

43

:

769

—

788

Sabatini

S

,

Heidstra

R

,

Wildwater

M

,

Scheres

B

(

2003

)

SCARECROW участвует в позиционировании корневой ниши стволовых клеток арабисид

.

Genes Dev

17

:

354

—

358

Самалова

M

,

Brzobohaty

B

,

Moore

I

(

2005

)

pOp6 / LhGR: строго регулируемая и высокочувствительная дексаметазон-индуцируемая система экспрессии табака

.

Завод J

41

:

919

—

935

Sauret-Güeto

S

,

Schiessl

K

,

Bangham

A

,

Sablowski

R

,

Coen

E

E

за счет взаимодействия с полем расходящейся полярности

.

PLoS Biol

11

:

e1001550

Schlereth

A

,

Möller

B

,

Liu

W

,

Kientz

M

,

Flipse

J

,

000

000 Mölacher

Jürgens

G

,

Weijers

D

(

2010

)

MONOPTEROS контролирует инициацию зародышевого корня, регулируя мобильный фактор транскрипции

.

Природа

464

:

913

—

916

Schoof

H

,

Lenhard

M

,

Haecker

A

,

Mayer

KF

,

Jürgens

G

,

Laux

Laux

Популяция клеток меристемы побегов Arabidopsis поддерживается регуляторной петлей между генами CLAVATA и WUSCHEL

.

Ячейка

100

:

635

—

644

Schubert

D

,

Lechtenberg

B

,

Forsbach

A

,

Gils

M

,

Bahadur

S

,

000

000

000

000

000

000

000

000

Arabidopsis Трансформанты Т-ДНК: преобладающая роль ген-специфического механизма восприятия РНК по сравнению с позиционными эффектами

.

Растительная ячейка

16

:

2561

—

2572

Серрано-Мислата

A

,

Schiessl

K

,

Sablowski

R

(

2015

)

Активный контроль размера клеток создает пространственные детали во время органогенеза растений

.

Curr Biol

25

:

2991

—

2996

Siligato

R

,

Wang

X

,

Yadav

SR

,

Lehesranta

S

,

Ma

G

,

Ursache

9000 I0002

0002 Zhang

J

,

Gorte

M

,

Prasad

K

и др.(

2016

)

MultiSite Gateway-совместимая генно-индуцируемая система для растений, специфичная для определенного типа клеток

.

Plant Physiol

170

:

627

—

641

Swarup

R

,

Kramer

EM

,

Perry

P

,

Knox

K

,

Leyser

HM

,

Haseloff

000

mster

Bhalerao

R

,

Bennett

MJ

(

2005

)

Для гравитропизма корня требуются латеральный покров корня и эпидермальные клетки для транспорта и ответа на мобильный сигнал ауксина

.

Nat Cell Biol

7

:

1057

—

1065

Tao

Z

,

Shen

L

,

Gu

X

,

Wang

Y

,

Yu

H

,

He

Y

(

ry

) репрограммирование пионерским фактором транскрипции у растений

.

Природа

551

:

124

—

128

Thoma

S

,

Hecht

U

,

Кипперс

A

,

Botella

J

,

De Vries

S

,

Somerville

(Somerville

) -специфическая экспрессия гена, кодирующего белок-переносчик липидов, локализованный в клеточной стенке, из Arabidopsis

.

Plant Physiol

105

:

35

—

45

Трускина

J

,

Vernoux

T

(

2018

)

Рост устойчивой стационарной структуры: координация поведения клеток и формирование паттерна на апикальной меристеме побега

.

Curr Opin Plant Biol

41

:

83

—

88

Valério

L

,

De Meyer

M

,

Penel

C

,

Dunand

C

(

2004

)

Анализ экспрессии мультигенной пероксидазы семейства Arabidopsis

0005.

Фитохимия

65

:

1331

—

1342

Vatén

A

,

Dettmer

J

,

Wu

S

,

Stierhof

YD

,

Miyashima

S

SR,

Yadav

000

9000 Rober 9000 Roberts Campilho

A

,

Bulone

V

,

Lichtenberger

R

и др.(

2011

)

Биосинтез каллозы регулирует симпластический трафик во время развития корня

.

Dev Cell

21

:

1144

—

1155

Врагович

К

,

Села

А

,

Фридландер-Шани

L

,

Фридман

Y

,

Hacham

Y

,

9000 9000 9000 N0005, Голландия

, Голландия

,

Mockler

TC

,

Savaldi-Goldstein

S

(

2015

)

Трансатом анализирует захват противоположных тканеспецифичных сигналов брассиностероидов, управляющих дифференцировкой корневой меристемы

.

Proc Natl Acad Sci USA

112

:

923

—

928

Wallner

ES

,

López-Salmerón

V

,

Belevich

I

,

Poschet

G

,

Jung

I

,

9000 9000 I0005

Grünwald 9,

Grünwald ,

Jokitalo

E

,

Hell

R

,

Helariutta

Y

и др.(

2017

)

Стриголактон- и каррикин-независимые белки SMXL являются центральными регуляторами образования флоэмы

.

Curr Biol

27

:

1241

—

1247

Wang

Y

,

Wang

J

,

Shi

B

,

Yu

T

,

Qi

J

,

Meyerowitz

EM

2014

)

Ниша стволовых клеток в пазухах листа устанавливается ауксином и цитокинином у Arabidopsis

.

Растительная ячейка

26

:

2055

—

2067

Weijers

D

,

Wagner

D

(

2016

)

Транскрипционные ответы на гормон ауксин

.

Анну Рев Завод Биол

67

:

539

—

574

Weijers

D

,

Van Hamburg

JP

,

Van Rijn

E

,

Hooykaas

PJ

,

Offringa

R

Cell (

) mediation межрегиональная коммуникация при семеноводстве Arabidopsis

.

Plant Physiol

133

:

1882

—

1892

Weijers

D

,

Sauer

M

,

Meurette

O

,

Friml

J

,

Ljung

K

,

Sandberg

as Offringa

R

(

2005

)

Поддержание эмбрионального распределения ауксина для апикально-базального паттерна с помощью PIN-FORMED-зависимого транспорта ауксина в Arabidopsis

.

Растительная ячейка

17

:

2517

—

2526

Weijers

D

,

Schlereth

A

,

Ehrismann

JS

,

Schwank

G

,

Kientz

M

,

000

000

000 Gürgens 9000 9000 9000

000

000 временная локальная передача сигналов для клеточной спецификации в эмбриогенезе Arabidopsis

.

Dev Cell

10

:

265

—

270

Weinmann

P

,

Gossen

M

,

Hillen

W

,

Bujard

H

,

Gatz

C

(экспрессия

,

,

c, реагирующая линия

позволяет) в целых растениях

.

Завод J

5

:

559

—

569

Wolf

S

,

Mravec

J

,

Greiner

S

,

Mouille

G

,

Höfte

H

home (

asis 2012

) сигнализация

.

Curr Biol

22

:

1732

—

1737

Wysocka-Diller

JW

,

Helariutta

Y

,

Fukaki

H

,

Malamy

JE

,

Benfey

PN

Функция молекулярного анализа SC

(

) Механизм формирования радиального рисунка, общий для корней и побегов

.

Девелопмент

127

:

595

—

603

Ямагути

M

,

Goué

N

,

Igarashi

H

,

Ohtani

M

,

Nakano

Y

,

000

000

Mortimer

Кубо

M

,

Катаяма

Y

,

Kakegawa

K

и др.(

2010

)

СОСУДИСТЫЙ NAC-ДОМЕН6 и СОСУДИСТЫЙ NAC-ДОМЕН7 эффективно индуцируют трансдифференцировку в элементы сосуда ксилемы под контролем индукционной системы

.

Plant Physiol

153

:

906

—

914

Zhang

X

,

Henriques

R

,

Lin

SS

,

Niu

QW

,

Chua

NH

(

2006

bacter, опосредованная трансформацией Arabidiana the Arabidiana,

bacter метод цветочного окунания

.

Nat Protoc

1

:

641

—

646

Zuo

J

,

Niu

QW

,

Chua

NH

(

2000

)

Трансактиватор на основе рецептора эстрогена XVE обеспечивает высокоиндуцируемую экспрессию генов в трансгенных растениях

.

Завод J

24

:

265

—

273

Заметки автора

© 2018 Американское общество биологов растений.Все права защищены.

© Автор (ы) 2018. Опубликовано Oxford University Press от имени Американского общества биологов растений. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/), которая разрешает неограниченное повторное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии, что оригинальная работа правильно процитировано.

Факты о пауках-волках

Бешеный паук-волк в зоопарке Далласа.

Фотография Джоэла Сартора, National Geographic Photo Ark

Пожалуйста, соблюдайте авторские права. Несанкционированное использование запрещено.

Общее название:

Wolf Spider

Научное название:

Lycosidae spp.

Тип:

Беспозвоночные

Рацион:

Насекомоядные

Название группы:

Кластер или скопление

180005

Средний срок жизни

мес.

Размер:

Диапазон видов от 0.От 24 до 1,2 дюймов

Пауки-волки — спринтеры в мире пауков. Большинство тысяч видов этого семейства не плетут паутины; вместо этого они преследуют и набрасываются на свою жертву насекомых, как волки, которые вдохновляют их имя.

Как только пауки-волки ловят свою добычу, они либо превращают ее в шар, либо вводят в нее яд, превращая внутренние органы в смузи из пауков-волков.

У всех пауков-волков восемь темных глаз, расположенных вокруг головы, или головогруди.На макушке блестят два больших глаза; спереди выглядывают еще два больших глаза; и четыре меньших глаза образуют ряд прямо над пастью паука.

Большинство пауков-волков проводят время на земле. Темные пестрые цвета на их телах помогают им сливаться с разлагающимся растительным веществом во время охоты или избегания хищников. Иногда они роют норы или проделывают норы под камнями или бревнами, чтобы жить в них.

Пауки-волки придумали, как жить где угодно. В то время как некоторые виды обитают на холодных скалистых вершинах гор, другие обитают в вулканических лавовых трубах.От пустынь до тропических лесов, от лугов до пригородных лужаек процветают пауки-волки; вероятно, есть поблизости. Один вид даже был обнаружен на посевах пшеницы, питаясь вредителями, такими как тля.

Когда наступает время спаривания, самцы пауков-волков привлекают самок, ритмично взмахивая длинными ротовыми частями (щупиками) или барабаня ими по листьям. После спаривания самка плетет круглый мешок для яиц, прикрепляет его к животу и носит с собой. Птенцы вылупляются внутри, затем появляются и забираются на спину мамы, пока не станут достаточно взрослыми, чтобы жить самостоятельно.

Считается, что многие виды имеют стабильные популяции. Но некоторые из них, например, паук-волк пустыни в Португалии и пещерный паук Кауаи на Гавайях, находятся под угрозой исчезновения.

Взгляд в глаза паука-волка

Отличное зрение. Невероятно маневренный. Закамуфлированный корпус. Клыки, вводящие яд. Коста-риканский паук-волк — оппортунистический хищник. Узнайте больше о харизматической дикой природе Коста-Рики в Untamed от Nat Geo Wild. Следуйте за режиссером Филипе ДеАндраде и двумя его лучшими друзьями, когда они путешествуют по Коста-Рике в поисках самых разнообразных, знаковых и неожиданных видов животных, которые может предложить страна.

Расположение предмета / Список выпадения — Фабрика рун 4

Разное.
Металлолом: добывается где угодно и провал при крафте / ковке
Двойная сталь: выпадает из минеральных трещин в Леоне Карнаке
10-кратная сталь: падает из минеральных трещин в Леоне Карнаке (редко)
Glitta Augite: обнаруживается при рубке сияющих деревьев (редко)
Невидимый камень: добывается где угодно (одно из первых мест — добывающий узел к югу от Селфии).
Легкая руда: можно найти на Майя-Роуд и холме Серсерезо, когда навык добычи достаточно высок.
Осколок рунической сферы: выпадает из Рагнарока в лабиринте Шаранс и изредка из Этельвилла в Парящей империи
Тенистый камень: добывается к западу от Обсидианового особняка (в области, где гаснет экран)
Лист енота: выпадает из Магнуто (босса енота) ) in the Demon Cave in Sercerezo Hill
Icy Nose: Dropped by Crystal Mammoth 2 in Rune Prana 3 / Sharance
Big Bird’s Comb: Dropped Mamadoodles в Cluck-Cluck Nest
Лепесток Rafflesia: Dropped Rafflesia в Delirium Cursed Ruins
Кукла: выпадает из Марионетты
Доказательство воина: выпадает из гоблинов-капитанов в Леоне Карнаке
Доказательство ранга: выпадает из гоблинов Донов в Леоне Карнаке
Трон Империи: выпадает из Рагнарока в Руна Прана 7 / Шаранс
Белый камень: найден в Сексе Территория (требуется, чтобы ваш ребенок и супруга были с вами)

Травы
Красный: Руины лавы Делириума
Оранжевый: Холм Серчерезо
Желтый: Осенняя дорога
Зеленый: Равнины Селфии
Синий: Селфия Равнины и лес Йокмир
Индиго: пещера Йокмир
Пурпурный: Равнины Селфии
Белый: территория Секс
Черный: Обсидиановый особняк

Семена / культура
Примечание: все семена можно купить в магазинах города после того, как вы выполните соответствующие Запросы.

Кристаллические семена: Все четыре типа кристальных семян можно найти на холме Серсерезо. Войдя, идите на юг, а затем на восток через другой мост. Отсюда скрытый путь на юг, а затем на восток, где вы найдете одинокое дерево на краю утеса. Осмотрите дерево. Вы получите сумку с хрустальным семенем, соответствующую сезону, в котором вы сейчас находитесь. Это можно делать один раз в день. Синий — весна, красный — осень, зеленый — лето, а белый — зима.

Семена деревьев: Идите к западу от главного входа в обсидиановый особняк и поверните на север, чтобы найти дерево, стоящее на поляне, окруженное обломками.Проверьте дерево. Раз в день вы можете получать семена апельсина, виноградные косточки, сияющие семена или семена яблони.

Мучнистое яблоко: Упало тайфуном, которое появляется на мосту на холме Серчерезо во время тайфунов.

Dungeon Seeds: В пещере демонов, после того как вы победите босса-енота, он предложит вам мешок Dungeon Seed в дополнение к любым предметам, которые он может выпустить.

Золотые семена репы: выпадают из призраков репы в рунической пране (очень низкая вероятность выпадения). Чтобы получить это из квеста, требуется либо доступ к руне праны, либо способность найти ананасовый сок в качестве рецепта / выпадения из лабиринта Шаранс.

Гриб-монарх: редко встречается везде, где могут появиться грибные предметы. Наилучшие шансы имеют равнина Селфии за пределами Гнезда Клекотей и гигантские пейзажи, расположенные в двух экранах к востоку от пещеры Идра.

Разнообразие растений увеличивается с усилением отрицательной зависимости от плотности в глобальном масштабе

Лесная служба США
Уход за землей и служение людям

Министерство сельского хозяйства США

1. Разнообразие растений увеличивается с усилением отрицательной зависимости плотности в глобальном масштабе

   Автор (ы): Джозеф А.Ламанна; Скотт А. Манган; Альфонсо Алонсо; Норман А. Бург; Уоррен И. Брокельман; Сараюд Буньявейчевин; Ли-Ван Чанг; Джих-Мин Чанг; Джордж Б. Чуйонг; Кейт Клей; Ричард Кондит; Susan Cordell ; Стюарт Дж. Дэвис; Такер Дж. Фернисс; Кристиан П. Джардина ; И. А. У. Нимал Гунатиллеке; К. В. Савитри Гунатиллеке; Фанлян Хэ; Роберт В. Хау; Стивен П. Хаббелл; Чанг-Фу Се; Вера М. Инман-Нарахари; Давид Яник; Дэниел Дж. Джонсон; Дэвид Кенфак; Лиза Корте; Камил Крал; Эндрю Дж.Ларсон; Джеймс А. Лутц; Шон М. МакМахон; Уильям Дж. МакШи; Эрве Р. Мемиаге; Ануттара Наталанг; Войтех Новотны; Перри С. Онг; Дэвид А. Орвиг; Ребекка Остертаг; Джеффри Дж. Паркер; Ричард П. Филлипс; Лоурен Сэк; И-Фанг Сунь; Х. Себастьян Тельо; Дункан В. Томас; Бенджамин Л. Тернер; Дилис М. Вела Диас; Томаш Вршка; Джордж Д. Вейблен; Эми Вольф; Сандра Яп; Джонатан А. Майерс
   Дата: 2017
   Источник: Science
   Серия публикаций: Scientific Journal (JRNL)
   Станция: Pacific Southwest Research Station
   PDF: Скачать публикацию (598.0 KB)
   
   Описание Теория предсказывает, что более высокое биоразнообразие в тропиках поддерживается специальными взаимодействиями между растениями и их естественными врагами, что приводит к конспецифической отрицательной зависимости плотности (CNDD). Используя более 3000 видов и почти 2,4 миллиона деревьев на 24 лесных участках по всему миру, мы показываем, что глобальные закономерности в разнообразии видов деревьев отражают не только более сильное CNDD в тропических и умеренных широтах, но и сдвиг в широте во взаимосвязи между CNDD и численностью видов.CNDD был сильнее для редких видов в тропических широтах по сравнению с умеренными, потенциально вызывая сохранение большего числа редких видов в тропиках. Наше исследование выявляет фундаментальные различия в природе биотических взаимодействий на местном уровне, которые способствуют поддержанию видового разнообразия в умеренных и тропических сообществах.
   Примечания к публикации
   • Вы можете отправить электронное письмо по адресу [email protected], чтобы запросить печатную копию этой публикации.
   • (Пожалуйста, укажите именно , какую публикацию вы запрашиваете, и свой почтовый адрес.)
   • Мы рекомендуем вам также распечатать эту страницу и прикрепить ее к распечатке статьи, чтобы сохранить полную информацию о цитировании.
   • Эта статья была написана и подготовлена ​​служащими правительства США в официальное время и поэтому находится в открытом доступе.
   Citation LaManna, Joseph A .; Mangan, Scott A .; Алонсо, Альфонсо; Бург, Норман А.; Брокельман, Уоррен Й .; Буньяведжчевин, Сараюдх; Чанг, Ли-Ван; Чан, Джих-Мин; Чуйонг, Джордж Б .; Клей, Кейт; Кондит, Ричард; Корделл, Сьюзен; Дэвис, Стюарт Дж .; Furniss, Tucker J .; Giardina, Christian P .; Gunatilleke, I.A.U. Nimal; Гунатиллеке, К. В. Савитри; Он, Фанлян; Хау, Роберт В .; Хаббелл, Стивен П .; Се, Чанг-Фу; Инман-Нарахари, Вера М .; Яник, Давид; Джонсон, Дэниел Дж .; Кенфак, Дэвид; Корте, Лиза; Крал, Камил; Ларсон, Эндрю Дж .; Лутц, Джеймс А .; МакМахон, Шон М .; МакШи, Уильям Дж.; Memiaghe, Hervé R .; Наталанг, Ануттара; Новотный, Войтех; Онг, Перри S .; Орвиг, Дэвид А .; Остертаг, Ребекка; Паркер, Джеффри Дж .; Филлипс, Ричард П .; Мешок, Лоурен; Солнце, И-Фанг; Телло, Х. Себастьян; Томас, Дункан В .; Тернер, Бенджамин Л .; Vela Díaz, Dilys M .; Вршка, Томаш; Weiblen, Джордж Д .; Волк, Эми; Яп, Сандра; Майерс, Джонатан А. 2017. Разнообразие растений увеличивается с усилением отрицательной зависимости от плотности в глобальном масштабе. Наука. 356 (6345): 1389-1392. https://doi.org/10.1126/science.aam5678.
   Процитировано
   Ключевые слова Зависимость от плотности, смертность, выживаемость, ForestGEO, лес, тропики
   Связанный поиск

   ---

   XML: Просмотр XML

Показать больше

Показать меньше

https://www.fs.usda.gov/treesearch/pubs/54495

Кемпинг White Wolf — Национальный парк Йосемити (Служба национальных парков США)

Расположение

От Тиога-Роуд (шоссе 120) примерно в часе езды к северу от долины Йосемити на высоте 8000 футов (2400 м) на высоте
(Просмотр карты, на которой показаны все кемпинги в национальном парке Йосемити [2 МБ PDF])
(Просмотр текущего прогноза погоды )

Сезон

Все кемпинги: примерно с июля по начало сентября (см. Предполагаемые даты открытия и закрытия в этом году)

Бронирование

Бронирование мест нет; кемпинг работает в порядке очереди.$ 18 / ночь

Подробнее о кемпинге

Места для палаток и автофургонов: 74 места для автофургонов до 27 футов и трейлеров до 24 футов

В каждом кемпинге есть пожарное кольцо , стол для пикника и шкафчик для еды [35 дюймов (Д) x43 дюйма (Ш) x28 дюймов (В)], а также рядом с ванной с питьевой водой и туалетами для смыва. .

Коммунальные услуги

Подключения: Нет
Свалка: Нет, но доступно только летом возле кемпинга Tuolumne Meadows и круглый год в долине Йосемити (в кемпинге Upper Pines)

Услуги

Продовольственные товары: Долина Йосемити (магазин в деревне Йосемити; магазин в деревне Карри; магазин в деревне Йосемити-Вэлли) и небольшой продуктовый магазин в Крейн-Флэт
Душевые кабины: В долине Йосемити (деревня Карри и хозяйственный лагерь)

Доступность

В этом кемпинге нет специально выделенных доступных кемпингов.

Положение

Домашние животные: Разрешены (всегда должны быть на поводке)
Пожары: Разрешены пожары на дровах и углях.
человек на сайт: Максимум шесть человек (включая детей) разрешено в кемпинге. Количество палаток не ограничено (если все они умещаются в кемпинге).

Также действуют дополнительные правила кемпинга.

Вы должны правильно хранить еду, чтобы защитить медведей Йосемити. Узнайте больше о медведях, правильном хранении еды и шкафчиках с едой.

Карта

.